我国咖啡炭疽病的病原鉴定及化防药剂筛选研究

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咖啡炭疽病作为我国咖啡第二大病害,对咖啡的产量及品质具有严重影响,已成为我国咖啡高产、稳产的主要生物限制因子之一。而国内关于咖啡炭疽病的研究相对较少,因此本研究针对我国咖啡主要种植区疑似炭疽病的咖啡叶片、枝条和浆果进行组织分离,利用形态学结合多基因序列分析方法对病原菌进行鉴定,并对分离菌株进行致病力测定,明确不同炭疽菌种的致病力及优势种群,旨在了解我国咖啡炭疽病病原菌种类及组成情况;同时针对不同类型的杀菌剂进行室内敏感性实验,了解不同类型杀菌剂对我国咖啡炭疽菌的毒力,并进行药剂混配,筛选具有增效作用的复配剂,延缓抗药性的产生,并可减少施药量、节约防治成本,为咖啡炭疽病的田间化学防治提供科学理论依据。主要研究结果如下:1、通过分离鉴定获得74个咖啡炭疽病菌菌株,通过形态学及多基因序列联合分析方法,将这些菌株归为7个种,Colletotrichum simense、Colletotrichum nupharicola、Colletotrichum theobromicola、Colletotrichum karstii、Colletotrichum gigasporum、Colletotrichum cliviae和Colletotrichum brevisporum。其中C.nupharicola、C.theobromicola、C.cliviae为首次发现能够侵染咖啡植株。2、采用离体叶片接种法,对所获得的菌株进行致病力测定,结果显示:不同菌种之间的致病力存在差异,致病力顺序为:C.theobromicola>C.cliviae>C.siamense>C.nupharicola>C.brevisporum>C.karstii>C.gigasporum。3、生物学特性研究结果表明:咖啡炭疽病菌对1 1种碳源中的麦芽糖和果糖这两者种碳源的吸收较好,对半乳糖和乙酸钾的利用率较差;在8种氮源中对硝酸钾、氯化铵、L~天冬酰胺和酵母氮源利用率最高,对尿素的利用率最差;菌丝体的适宜生长温度为25~30℃,当温度低于4℃或高于38℃时菌丝体基本停止生长;病原菌在pH值3~11的范围内均可生长,最适pH为7,总体来说咖啡炭疽菌对碱性环境更为耐受,对于酸性较强的环境则较难适应;光照条件对菌丝体生长无显著影响;当处理温度增高到50℃后菌丝体不能恢复生长。4、利用菌丝生长速率法测定15种杀菌剂对咖啡炭疽病菌的室内毒力,结果表明:咪鲜胺、多菌灵、咪鲜胺锰盐、嘧菌酯、苯醚甲环唑对咖啡炭疽菌菌丝生长具有较强的抑制作用,其EC50值分别为:0.0358 μg/mL、0.128 μg/mL、0.1452μg/mL、0.1616 μg/mL、0.8367 μg/mL;其次为嘧霉胺、甲基硫菌灵、戊唑醇、硫酸铜钙、唏硫玛琳,其EC50值分别为:1.8686 μg/mL、3.4059 μg/mL、7.4905μg/mL、12.4788 μg/mL、15.0906μg/mL;效果较差的几种杀菌剂为腈菌脂、代森锰锌、百菌清、丙森锌、异菌脲,其EC50值分别为:36.4532 μg/mL、53.3999μg/mL、290.0661 μg/mL、849.7937 μg/mL、4400.3908 μg/mL。对敏感性较高的杀菌剂单剂进行混配增效配方的筛选,结果表明:咪鲜胺与苯醚甲环唑混配后具有明显的增效作用,进一步进行了室外盆栽试验,结果表明混配杀菌剂的室外防效与室内混配结果一致。
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