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目的：观察艾灸不同作用因素对阿茨海默病的影响,从学习记忆行为,脑组织线粒体功能,氧化应激状态,细胞凋亡线粒体途径,尿液代谢物变化角度探索艾灸、艾烟、无烟灸的作用机制。方法：5月龄C57BL/6小鼠作为空白对照组(10只/组),同龄40只APP/PS1小鼠随机分为模型组、艾灸组、无烟灸组、艾烟组(10只/组)。艾灸与无烟灸组灸治小鼠关元穴。艾烟组小鼠束缚暴露于10～15mg/m3烟气环境,空白与模型组小鼠常规束缚暴露于正常环境。所有干预20min/天,6天/周,共8周。于第4周干预后收集尿液进行尿液代谢组学分析。于第9周进行自主行为测试、避暗实验、Morris水迷宫实验；第11周取材,ELISA法检测前额叶、海马中ROS、8-OhdG、4-HNE、3-NT、ATP含量,线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ活性。刚果红染色检测海马β淀粉样蛋白沉淀,免疫组化法检测Bel-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9表达。代谢组学分析各组小鼠尿液代谢物差别,筛选潜在生物标记物。结果：1.行为学结果模型组小鼠中枢神经系统兴奋性(P=0.004)与学习记忆功能(P=0.026,P=0.001)均较空白组小鼠降低。与模型组相比,无烟灸组小鼠于实验初期饮食量增加(P<0.01)。自主行为测试中,艾灸组较模型组、艾烟组奔跑距离增加(P=0.004,P=0.019),较艾烟组抬头次数增多(P=0.007)。避暗实验中,艾灸组学习潜伏期较无烟灸组降低(P=0.012),记忆测试中,与模型组相比,艾灸、艾烟、无烟灸组均表现出较长的记忆潜伏期(P=0.000、P=0.000、P=0.007),仅艾灸、艾烟组(P=0.001、P=0.004)犯错次数较少。Morris水迷宫试验中,各组小鼠搜索平台表现随训练次数增加,呈潜伏期递减趋势,各组间无显著差别。定位航行实验中空白组游泳时间长于模型组(P=0.001)。其余各组间无差异。2.脑组织氧化应激状态模型组小鼠脑组织前额叶、海马中ROS、8-0hdG、4-HNE、3-NT含量高于空白组(P<0.05)。与模型组小鼠比较,前额叶中艾灸组ROS含量显著降低(P=0.002)；8-OhdG含量艾灸组(P=0.002)、艾烟组(P=0.003)、无烟灸组(P=0.001)均降低；4-HNE含量艾灸组(P=0.001)、艾烟组(P=0.000)、无烟灸组(P=0.002)均显著降低；3-NT含量艾灸组(P=0.009)、艾烟组(P=0.002)、无烟灸组(P=0.004)含量均显著降低。与模型组小鼠比较,海马中ROS含量艾灸组显著降低(P=0.001),8-0hdG含量艾灸组(P=0.001)、艾烟组(P=0.000)、无烟灸组(P=0.000)含量均显著降低；3-NT含量艾灸组(P=0.007)、艾烟组(P=0.001)、无烟灸组(P=0.001)均显著降低。艾灸组海马中ROS含量低于无烟灸组(P=0.017)。3.脑组织线粒体功能模型组小鼠脑组织前额叶、海马中ATP含量、线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ活性均低于空白组(P=0.05)。与模型组小鼠比较,在前额叶中ATP含量艾灸组(P=0.000)、升高；线粒体呼吸链复合物Ⅰ艾灸组(P=0.000)、艾烟组(P=0.000)、无烟灸组(P=0.000)活性均增强；线粒体呼吸链复合物Ⅱ活性艾灸组(P=0.000)显著增高,线粒体呼吸链Ⅲ活性艾灸组(P=0.000)、艾烟组(P=0.000)、无烟灸组(P=0.000)含量均显著升高。与模型组小鼠比较,在海马中ATP含量艾灸组(P=0.000)、艾烟组(P=0.000)、无烟灸组(P=0.001)均显著升高；线粒体呼吸链复合物Ⅰ艾灸组(P=0.000)、艾烟组(P=0.000)、无烟灸组(P=0.023)含量均显著升高；线粒体呼吸链复合物Ⅲ艾灸组(P=0.000)、艾烟组(P=0.000)、无烟灸组(P=0.001)含量均显著升高。艾灸组在前额叶与海马中ATP含量(P=0.018),线粒体呼吸链复合物Ⅰ(P=0.011,P=0.001),线粒体呼吸链复合物Ⅱ(P=0.019),线粒体呼吸链复合物Ⅲ(P=0.000,P=0.001)活性均高于无烟灸组。艾烟组前额叶与海马中线粒体呼吸链复合物Ⅰ(P=0.026,P=0.020),线粒体呼吸链复合物Ⅲ(P=0.018,P=0.025)活性均高于无烟灸组。4.脑组织细胞凋亡线粒体途径与β淀粉样沉淀模型组小鼠脑组织前额叶、海马中Caspase-3、Caspase-9表达均高于空白组(P<0.05),Bcl-2表达低于空白组(P<0.05)。与模型组小鼠相比,前额叶中Bcl-2艾灸组(P=0.000)、艾烟组(P=0.001)、无烟灸组(P=0.002)阳性表达的平均光密度强度显著增高；Bax艾灸组(P=0.000)、艾烟组(P=0.000)、无烟灸组(P=0.001)小鼠阳性表达的平均光密度强度显著减少；Caspase-3艾灸组(P=0.009)、艾烟组(P=0.018)、小鼠阳性细胞表达减少；Caspase-9艾灸组(P=0.012)小鼠较模型组小鼠阳性细胞表达减少。与模型组小鼠相比,海马CA3区中Bcl-2艾灸组(P=0.000)、艾烟组(P=0.000)、无烟灸组(P=0.012)小鼠阳性表达的平均光密度强度升高；Bax艾灸组(P=0.001)、艾烟组(P=0.002)、无烟灸组(P=0.012)小鼠阳性表达平均光密度强度减少；Caspase-3艾灸组(P=0.035)小鼠阳性细胞表达减少。模型组较空白组小鼠海马中形成较多淀粉样斑块,神经元数量减少,排列散乱。空白组未见淀粉样沉淀,艾灸组、艾烟组、无烟灸组仅见散在斑块,神经元轮廓清晰,胞核明显,没有明显神经元缺失。5.尿液代谢组学研究模型组、空白组、艾灸组、艾烟组、无烟灸组五组聚类较明显,差异代谢化合物16种,代谢产物涉及氨基酸代谢、碳水化合物代谢和体内氮元素传递等生物途径；空白组与模型组鉴别出差异代谢产物17种。与空白组相比,模型组小鼠尿液中硫酸吲哚酚、已酰甘氨酸、庚酰胺基乙酸、吲哚乙酸、庚基丙二酸、肌氨酸、马尿酸、2-Methylbutyrylglycine、异丁酰基甘氨酸、n1-甲基-4-吡啶酮-3-羟基胺、丙酰左旋肉碱、N-庚酰甘氨酸、酰脲丙酸、甲基巴豆酰甘氨酸相对含量下调,甲基马尿酸上调,这些代谢产物参与泛酸盐和辅酶A的生物合成、氨基酸、嘌呤、嘧啶代谢,烟酸和烟酰胺等代谢通路；模型组与艾灸组鉴别出差异代谢产物15种,与模型组相比,艾灸组小鼠尿液中硫酸对甲酚、已酰甘氨酸、鼠胆酸、2-甲基马尿酸、3α-羟基5β-胆烷酸、肌氨酸、5β-三乙四胺胆烷酸的相对含量上调,而甲基马尿酸、黄尿酸、丁烯基肉碱、N-甲酰-L-蛋氨酸相对含量下调。代谢产物主要涉及碳水化合物、氨基酸的合成与分解等代谢途径。结论：1.艾灸、艾烟、无烟灸可以通过调节线粒体呼吸链功能,减轻氧化应激损伤；抑制细胞凋亡线粒体途径相关蛋白表达,以保护神经元,进而延缓AD病理进程。艾烟干预对线粒体功能的调节作用比温热刺激更强,艾烟干预与温热刺激对细胞凋亡线粒体途径上游蛋白作用更明显。2.艾灸、艾烟、无烟灸均可提高AD模型小鼠中枢神经系统兴奋性,增强运动能力,恢复记忆功能,且艾灸比单纯艾烟干预或温热刺激效应更强。3.艾灸、艾烟、无烟灸能够调节AD模型小鼠体内氨基酸、淀粉蔗糖代谢、戊糖和葡萄糖醛酸酯相互转化、氮代谢以及氨酰生物合成等代谢途径中相关生物标志物含量。