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H9N2亚型禽流感病毒和鸡传染性支气管炎病毒均是鸡群中重要的呼吸道病原。两者的混合感染在我国鸡群中普遍存在,给养禽业造成了巨大的危害。迄今为止,人们对其混合感染的协同致病机制仍不清楚,并缺少有效的防控措施。为此我们用SPF鸡建立了H9N2亚型AIV和IBV混合感染模型,通过临床观察、显微病理变化分析、]eal-time PCR等方法对各组鸡的发病情况、排毒规律、病毒在鸡体内的组织分布情况和感染后先天性免疫应答水平进行了系统研究。旨在了解这两种病毒单独或混合感染临床发病的真实情况,为认识、诊断和有效地预防和控制这两种传染病提供理论依据。研究发现,H9N2亚型AIV单独感染组未出现鸡的死亡,IBV单独感染组和混合感染组的死亡率分别为12%和48%,混合感染组死亡率显著高于IBV单独感染组。此外混合感染组的鸡发病更早,病程更长,临床症状更加严重。因此,我们推断这两种病毒之间存在明显的协同致病作用。对攻毒后1-13天内各组鸡的排毒水平进行检测,发现与两种病毒的单独感染组相比,不论是呼吸道还是泄殖腔排毒,混合感染组在监测的整个时间段内H9N2AIV和IBV两种病毒的排毒率、排毒量更高,相应的排毒周期更长。对各组鸡气管、肺脏、肾脏、胸腺、脾脏和法氏囊进行病毒滴度测定,结果表明IBV在与H9N2AIV混合感染的情况下,在以上六个组织中的复制能力均显著提高。H9N2AIV在SPF鸡体内复制的主要靶器官为气管和肺脏,混合感染组H9N2AIV在气管和肺脏的复制水平显著高于H9N2AIV单独感染组,并且混合感染组在肾脏和法氏囊中也能检测到H9N2AIV,而单独感染组仅在攻毒后第7天在法氏囊中检测到含量相对较低的H9N2AIV病毒。因此,与单独感染组相比,混合感染组H9N2AIV和IBV病毒在鸡体内的增殖滴度更高,感染的组织更广泛。细胞因子IFN-α、 IFN-β、IFN-γ、IL-1β、IL-18基因的表达水平测定结果表明,混合感染组引起了肺脏,肾脏,法氏囊和胸腺中更加强烈的细胞因子应答,并且细胞因子的表达水平与病毒在相应组织中的复制水平密切相关。因此,病毒的高效复制引起细胞因子的过量表达可能是混合感染组比单独感染组发病严重的原因。综上所述,H9N2AIV和IBV混合感染的协同致病作用非常明显,与单独感染组相比,混合感染组的临床症状更加严重,发病率和死亡率明显升高。同时混合感染促进了H9N2AIV和IBV在机体内的增殖,导致两种病毒在呼吸道和泄殖腔的排毒水平明显提高。此外,混合感染诱导了宿主更加强烈的细胞因子应答,这可能与H9N2AIV和IBV的协同致病相关。