外源性基因经乳腺管注射在大鼠乳腺中表达的机理研究

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乳腺生物反应器属于转基因动物的范畴,自转基因技术创立以来,几十年里取得了巨大进展,拥有着广阔的应用前景。从转基因动物的乳腺中获得珍贵医用人类蛋白质是现代生物技术学应用的重要领域。乳腺导管注射可以用来制作乳腺生物反应器,本实验的目的是为了研究外源性基因经乳腺导管注射在大鼠乳腺中表达的机理,探索提高基因转染效率的对策。 本实验的研究内容分为三个部分。 在第一部分实验中,取8个不同发育时间点(4周龄、9周龄未孕、妊娠7天、妊娠12天、妊娠18天、产后1周、产后2周、产后3周)的雌性大鼠乳腺组织进行普通石蜡切片、HE染色,在光镜下观察其形态学变化。结果发现:大鼠的乳腺是复管泡腺,其发育过程中形态学变化最明显的时间是在妊娠12天至产后14天,表现为大量浆液性腺泡的腺细胞不断增生及分泌活动,其中在妊娠12天和产后1周可以发现数量相对较多的处于分裂期的腺细胞。大鼠的乳腺发育过程主要是在孕期和泌乳期完成的,发育随妊娠的开始而进行,随泌乳的结束而退化。另取同一发育时期的大鼠乳腺制作卡红染色的全组织片,观察了乳腺导管在发育过程中的整体变化。发现4周龄时,大鼠乳腺主要由细长而稀疏的导管构成,导管极少有侧枝;9周龄时乳腺导管的主干上发出较多侧枝,并且末端出现端芽;妊娠后,乳腺导管增粗,侧枝更加密集,末球出现并逐渐增多;产后,乳腺导管基本维持在妊娠末期的形态特点;哺乳结束后乳腺导管恢复成妊娠前的状态。
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