论文部分内容阅读
1.AS2O3诱导MGC803细胞凋亡中TRF1、TRF2蛋白表达及端粒稳定性的作用
目的:分析三氧化二砷(As2O3)对人胃癌MGC803细胞端粒重复序列结合因子1、2(TRF1、TRF2)表达及端粒稳定性的影响,探讨As2O3诱导细胞凋亡的机理。
方法:体外培养MGC803细胞,MTT比色实验分析As2O3对MGC803细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测MGC803细胞凋亡,进行染色体端—端融合分析及Westernblot检测TRF1、TRF2蛋白表达。
结果:MTT法显示As2O3对人胃癌MGC803细胞有明显地抑制作用,且呈时间、剂量依赖关系。流式细胞术检测出现典型的凋亡峰,并随As2O3浓度增加和作用时间延长而增高,对照组未见此改变。染色体端—端融合分析显示5μmol·L-1AS2O3处理MGC803细胞48h染色体融和率明显高于对照组。WesternBlot分析结果表明TRF1在5μmol·L-1As2O3处理MGC803细胞48h后,表达上升,而TRF2表达下降。
结论:1.As2O3(1.25-40pmol·L-1)可明显抑制MGC803细胞的生长和诱导其凋亡,与药物浓度及作用时间均具有明显依赖关系。2.As2O3可能通过下调TRF2蛋白表达、上调TRF1蛋白表达及使染色体端—端融合,诱导MGC803细胞凋亡。
2.TRRF1、TRF2蛋白在砷致MGC803细胞染色体畸变中的作用
目的:分析端粒重复序列结合因子1、2(TRF1、TRF2)在砷致MGC803细胞染色体畸变中的作用,探讨砷致细胞增殖及癌变的可能机理。
方法:以人MGC803细胞为实验对象,采用染色体分析检测畸变率及有丝分裂指数(MI),Westernblot检测TRF1、TRF2、PCNA蛋白表达。
结果:0.625μMAs2O3处理MGC803细胞4周后,MI、PCNA蛋白表达均高于对照组,显示细胞分裂增殖增强;染色体分析显示畸变率明显高于对照组,畸变类型以融合染色体(即双或多着丝粒、环形染色体)为主;同时,WesternBlot分析结果表明TRF1表达上升,而TRF2表达下降。
结论:1.低浓度砷较长期处理,可促进MGC803细胞增殖,可使细胞染色体畸变率增加。2.低浓度砷通过上调TRF1蛋白表达和下调TRF2蛋白表达,导致染色体畸变率增加以及基因组稳定性下降,从而加快细胞增殖。