加减血癥汤抗肿瘤作用及相关机制的实验研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qwe007wc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究目的:探讨加减血癥汤抗肿瘤作用及相关机制。研究方法:1.应用液相色谱-质谱联用技术测定加减血癥汤总提物有效成分。2.采用MTT法检测加减血癥汤对体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901不同浓度的增殖能力的抑制作用及其与时间的相关性。3.采用Annexin V/PI荧光双染法检测加减血癥汤对人胃癌细胞株SGC-7901细胞凋亡的影响。4.采用流式细胞仪检测不同浓度加减血癥汤对人胃癌细胞株SGC-7901细胞周期的影响。5.通过鸡胚尿囊膜技术及体外增殖实验验证加减血癥汤的抗血管生成作用。6.采用RT-PCR法检测SGC-7901细胞中VEGF、mTOR、PI3K、AKt等相关基因的表达变化及其浓度相关性。7.运用Western Blot法检测加减血癥汤体外作用于人胃癌细胞株SGC-7901相关蛋白表达的变化及其浓度相关性。8.建立裸鼠胃癌皮下移植瘤模型,观察加减血瘤汤对裸鼠胃癌皮下移植瘤的抑制作用,根据荷瘤裸鼠移植瘤的体积和重量计算加减血癥汤提取液的抑瘤率;HE染色光镜观察肿瘤组织的形态结构;免疫组织化学法检测加减血癥汤提取液对肿瘤组织抗血管生成相关分子蛋白的表达。研究结果:1.加减血癥汤提取液主要的化学成分为:芍药苷、阿魏酸、桂皮醛、芒柄花素、姜黄素、藁本内酯、莪术醇、熊果酸、齐墩果酸,且醇提液的有效成分明显高于水提液。2.加减血癥汤对人胃癌细胞株SGC-7901增殖能力抑制作用明显,并且呈现明显的浓度及时间相关性。3.加减血癥汤能显著诱导人胃癌细胞SGC-7901的凋亡。4.不同浓度的加减血癥汤提取液干预人胃癌SGC-7901细胞生长48h后,G1期细胞明显增多,并且随着药物浓度的增加,细胞比例也随之增加,具有明显的剂量依赖性。5.加减血癥汤有明显抗血管生成作用。6.加减血癥汤可下调人胃癌SGC-7901细胞中VEGF、mTOR、PI3K、AKt的mRNA的表达。7.不同浓度加减血癥汤均对人胃癌SGC-7901细胞中VEGF、mTOR、PI3K、AKt蛋白的表达有下调作用。8.加减血癥汤对接种人胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤的生长具有明显的抑制作用,大、中、小剂量组抑瘤率分别达到58.98%、45.02%,27.52%。免疫组化显示加减血癥汤组VEGF、CD31、HIF-1α、PI3K、p-mTOR、p-AKT、COX-2蛋白表达降低,且随着剂量的增高,蛋白表达逐渐下降。研究结论:加减血癥汤能明显抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖,并诱导人胃癌细胞株SGC-7901的凋亡、调节细胞周期;加减血癥汤能下调人胃癌细胞株SGC-7901中VEGF、 mTOR、PI3K, Akt等相关基因及蛋白的表达;加减血癥汤可降低接种人胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤中VEGF、CD31、HIF-1α、PI3K、p-AKT、p-mTOR、COX-2蛋白表达,且呈剂量相关性。因此我们推测加减血瘤汤的抗肿瘤作用与调控VEGF、CD31、 HIF-1α、 PI3K/AKT/mTOR、COX-2等信号通路蛋白及抗血管生成密切相关。
其他文献
江苏南通三建集团有限公司是房屋特级资质企业,主营各类房屋建筑安装工程施工总承包,兼营市政公用工程施工总承包、地基与基础工程专业承包、机电设备安装工程专业承包。在新加
为减少大块率和根底,提高爆破效果,山西桃园东义水泥有限公司石料生产线通过理论计算和现场试验,取得了大孔距小排距技术在中深孔爆破中的一些应用经验。当孔距为4.8m,排距为3.5m时
智能电网在整个的电力运营系统中占有重要的地位,其优势主要体现在变电站系统以及辅助系统的智能化上,智能变电站不仅 在技术上采用了最新的传感器技术、智能组件技术以及光
针对晋北煤业5-101工作面轨道巷特殊的三软煤层及风化不稳定顶板地质情况,研究分析原支护方案下巷道围岩大变形的原因,并优化设计支护方案,提出采用“加密高强锚杆+注浆锚索
目的分析人性化护理干预用于老年糖尿病高血压合并脑梗死中的实施效果。方法选取我院2017年5月~2018年5月期间收治的96例老年糖尿病高血压合并脑梗死患者,随机分为观察组与对
目的探讨经不同刺激方式终止室上性心动过速合并冠心病患者的疗效对比。方法此次依随机将2017年7月-2018年3月于我院诊治的室上性心动过速的冠心病患者40例分为对照组和观察
城市是历史发展的产物,是集人类文明与传统于一身的聚集体,其结构庞大复杂,内容包罗万象.城市的发展带来了诸多问题,诸如环境污染、城市的过分膨胀,资源的浪费及人口的过分集
东丽区建设管理委员会是东丽区政府的行政职能部门,主要负责全区的基础设施、园林绿化、供热采暖、建筑市场建设与管理等工作。经过20多年的发展建设,现有8个机关科室和10个基
一、公众参与城市规划的意义公众参与城市规划的意识是逐步培养起来的,这里面除了公众自己要努力以外,政府和规划管理部门也要改造环境、创造条件、提高公众的参与意识和他们