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研究目的:探讨加减血癥汤抗肿瘤作用及相关机制。研究方法:1.应用液相色谱-质谱联用技术测定加减血癥汤总提物有效成分。2.采用MTT法检测加减血癥汤对体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901不同浓度的增殖能力的抑制作用及其与时间的相关性。3.采用Annexin V/PI荧光双染法检测加减血癥汤对人胃癌细胞株SGC-7901细胞凋亡的影响。4.采用流式细胞仪检测不同浓度加减血癥汤对人胃癌细胞株SGC-7901细胞周期的影响。5.通过鸡胚尿囊膜技术及体外增殖实验验证加减血癥汤的抗血管生成作用。6.采用RT-PCR法检测SGC-7901细胞中VEGF、mTOR、PI3K、AKt等相关基因的表达变化及其浓度相关性。7.运用Western Blot法检测加减血癥汤体外作用于人胃癌细胞株SGC-7901相关蛋白表达的变化及其浓度相关性。8.建立裸鼠胃癌皮下移植瘤模型,观察加减血瘤汤对裸鼠胃癌皮下移植瘤的抑制作用,根据荷瘤裸鼠移植瘤的体积和重量计算加减血癥汤提取液的抑瘤率;HE染色光镜观察肿瘤组织的形态结构;免疫组织化学法检测加减血癥汤提取液对肿瘤组织抗血管生成相关分子蛋白的表达。研究结果:1.加减血癥汤提取液主要的化学成分为:芍药苷、阿魏酸、桂皮醛、芒柄花素、姜黄素、藁本内酯、莪术醇、熊果酸、齐墩果酸,且醇提液的有效成分明显高于水提液。2.加减血癥汤对人胃癌细胞株SGC-7901增殖能力抑制作用明显,并且呈现明显的浓度及时间相关性。3.加减血癥汤能显著诱导人胃癌细胞SGC-7901的凋亡。4.不同浓度的加减血癥汤提取液干预人胃癌SGC-7901细胞生长48h后,G1期细胞明显增多,并且随着药物浓度的增加,细胞比例也随之增加,具有明显的剂量依赖性。5.加减血癥汤有明显抗血管生成作用。6.加减血癥汤可下调人胃癌SGC-7901细胞中VEGF、mTOR、PI3K、AKt的mRNA的表达。7.不同浓度加减血癥汤均对人胃癌SGC-7901细胞中VEGF、mTOR、PI3K、AKt蛋白的表达有下调作用。8.加减血癥汤对接种人胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤的生长具有明显的抑制作用,大、中、小剂量组抑瘤率分别达到58.98%、45.02%,27.52%。免疫组化显示加减血癥汤组VEGF、CD31、HIF-1α、PI3K、p-mTOR、p-AKT、COX-2蛋白表达降低,且随着剂量的增高,蛋白表达逐渐下降。研究结论:加减血癥汤能明显抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖,并诱导人胃癌细胞株SGC-7901的凋亡、调节细胞周期;加减血癥汤能下调人胃癌细胞株SGC-7901中VEGF、 mTOR、PI3K, Akt等相关基因及蛋白的表达;加减血癥汤可降低接种人胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤中VEGF、CD31、HIF-1α、PI3K、p-AKT、p-mTOR、COX-2蛋白表达,且呈剂量相关性。因此我们推测加减血瘤汤的抗肿瘤作用与调控VEGF、CD31、 HIF-1α、 PI3K/AKT/mTOR、COX-2等信号通路蛋白及抗血管生成密切相关。