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目的：以往的研究已证实白蛋白尿可激活肾小管间质局部肾素血管紧张素系统(renin-angiotensinsystem，RAS)，其中血管紧张素II(angiotensinII，AngII)是主要的效应因子，是发生肾小管间质纤维化(tubulointerstitialfibrosis，TIF)最有效的刺激因子。而血管紧张素转换酶(angiotensin-convertingenzyme,ACE)和它的同源酶ACE2通过调节AngII的产生和降解而决定其在肾组织局部的浓度。本研究观察白蛋白对肾小管上皮细胞ACE、ACE2及AngII表达的影响及细胞超微结构的改变，并进一步观察卡托普利(captopril，CAP)对上述指标的影响，以探讨蛋白尿激活肾脏局部RAS的机制及血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin-convertingenzymeinhibitor，ACEI)的肾保护作用的机制。
方法：采用浓度分别为2.5、5、10mg/ml的牛血清白蛋白(bovineserumalbumin，BSA)刺激人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)作用6和12h。分别采用实时定量RT-PCR和WesternBlot检测ACE、ACE2mRNA和蛋白水平的表达。采用透射电镜技术(transmissionelectronmicroscopy,TEM)观察BSA对HK-2细胞超微结构的影响。同时采用激光共聚焦显微镜技术(laserscanningconfocalmicroscope，LSCM)观察ACE及ACE2在HK-2细胞的表达。采用放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)检测细胞上清液中AngII的浓度。最后观察CAP(10μmol/L)对上述各项指标的影响。
结果：不同浓度BSA作用12h使HK-2细胞ACEmRNA和蛋白表达显著增加(p分别<0.05)，而ACE2mRNA和蛋白表达显著下降(p<0.05)，并呈浓度依赖性。同时BSA10mg/ml作用6h和12h后，呈时间依赖性地增加ACEmRNA和蛋白表达(p<0.05)，而抑制ACE2mRNA及蛋白表达(p<0.05)。TEM显示BSA使细胞超微结构内质网扩张明显，胞浆中出现大量次级溶酶体及吞饮泡，细胞核膜皱缩，出现染色质边集、浓缩等典型凋亡的改变。LSCM可见ACE、ACE2主要分布于细胞膜，且两者表达部位重合。RIA结果提示BSA呈时间-浓度依赖性地增加细胞上清液中的AngII的浓度(p<0.05)，CAP可抑制BSA引起的上述改变(p<0.05)。
结论：1.BSA可显著增加HK-2细胞ACE的表达而抑制ACE2的表达，呈时间和浓度依赖性。2.BSA可显著增加HK-2细胞上清液中的AngII的浓度，呈时间和浓度依赖性。3.BSA可引起HK-2细胞发生凋亡。4.CAP可抑制BSA引起的ACE、ACE2和AngII的上述变化。