多功能AgBiS2纳米颗粒用于骨肉瘤光热/光动力治疗的实验研究

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目的:骨肉瘤已成为最具威胁性的恶性肿瘤之一,严重威胁着人类的生命健康。然而,目前针对骨肉瘤的标准疗法疗效并不令人十分满意,常伴随着棘手的并发症,严重影响患者生活质量。近年来,基于铋(Bi)的纳米材料愈来愈受到重视。铋基纳米材料被深入研究应用于肿瘤的光热和光动力治疗领域,并且十分适用于骨肉瘤这种高度恶性肿瘤的诊断和治疗。但是这些材料大多数造价昂贵、合成不易。因此,大规模生产这些材料仍然是一个挑战。在本研究中,我们将用一种简单的溶剂热法合成AgBiS2纳米粒子(NPs),并用Tween-20(聚氧乙烯山梨糖醇酐单月桂酸酯)进行表面改性。同时,将深入研究NPs表征、生物相容性、光热效应、光动力效应、CT成像性、抗菌性和肿瘤消融能力等理化性质和生物功能。方法:应用溶剂热法合成并通过Tween-20表面改性得到亲水性AgBiS2NPs。通过高分辨率透射电镜观测AgBiS2 NPs的表征,再利用X线衍射仪研究NPs的晶体结构和纯度。AgBiS2 NPs的生物相容性方面,应用标准的细胞计数试剂盒-8(CCK-8)方法研究NPs的细胞毒性,并通过体外急性溶血实验研究NPs的血液相容性,以及对治疗后的骨肉瘤小鼠各器官进行H&E染色实验和小鼠体重监控研究NPs的体内安全性。利用分光光度计确定NPs的光吸收峰,并通过经典的加热/冷却实验计算出NPs的光热转化率;通过测定NPs对UMR-106(骨肉瘤细胞系)细胞内过氧化氢(H2O2)、单线态氧和活性氧(ROS)产生能力的测定研究其光动力效应。对于AgBiS2的CT成像能力研究,通过小鼠CT机扫描不同浓度NPs测定并计算出其CT对比度(HU位),再通过CT扫描骨肉瘤内的NPs来研究其体内CT成像能力。通过光热/光动力治疗后的UMR-106细胞毒性实验,用活/死染色研究NPs体外骨肉瘤消融能力,并通过骨肉瘤内的光热/光动力治疗测定其体内骨肉瘤消融能力。AgBiS2 NPs的抗菌性通过将不同浓度NPs与临床常见的金黄色葡萄球菌(S.aureus)共培养得出。结果:我们制备出了尺寸合适(粒径约为80nm)的指纹样AgBiS2NPs。该NPs浓度低于250μg/mL时几乎没有细胞毒性,不同浓度NPs均有着良好的血液相容性,符合医用植入材料标准。NPs可以有效地将近红外光(NIR)能转换为热能(具有36.51%的光热转换效率),并显著增加NIR照射下细胞内H2O2和单态氧等ROS的产生。AgBiS2在NIR下的PTT/PDT联合效应成功抑制了小鼠体内高度恶性的骨肉瘤的生长。此外,AgBiS2 NPs表现出了优秀的CT对比度(HU值为31.95)和强力的抗菌性能,在250μg/mL的浓度下时对临床常见的金黄色葡萄球菌杀灭能力达到95%,当浓度超过500μg/mL,抗菌性高达100%。结论:在本研究中,我们以简便的溶剂热法合成出了形貌和尺寸合适的多功能生物相容性AgBiS2NPs。NPs表现出了可观的光热效应和光动力效应,可以高效杀死体内外高度恶性的骨肉瘤,并实现了骨肉瘤的CT实时监测。同时,NPs对金黄色葡萄球菌高效的杀灭能力能有效防止治疗后感染的发生。总之,AgBiS2NPs在光疗、CT成像及抗菌方面的特性表明,它是恶性肿瘤治疗学的前景光明的候选者。
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