近年来,大量研究证实,大型真菌漆酶具有降解染料和农药的作用,在污水处理和环境修复方面具有广阔的应用前景。鉴于此,本研究以花脸香蘑菌株JZ05为试验材料,筛选并优化了该菌株的菌丝培养基配方和培养条件;优化了该菌株产漆酶的液体发酵条件;然后以花脸香蘑发酵液为粗酶液,利用离子交换层析等纯化方法,对花脸香蘑漆酶进行分离纯化与鉴定;最后研究了花脸香蘑发酵液和漆酶对染料的降解效果。通过以上试验,得出以下结论:1.花脸香蘑菌株JZ05母种的最适碳源为玉米粉,最适氮源为蛋白胨,培养基的最适碳氮比为40:1,菌丝最适生长温度为23℃,最适酸碱度为pH 7.0;花脸香蘑漆酶液体发酵的最佳条件为:最适转速150 rpm,最适接种量为12片0.5 mm菌片,最适培养温度27℃。在液体培养基中添加玉米粉可以提高漆酶的产量,且最适的玉米粉添加量为1.0 g/L。2.以花脸香蘑的液体发酵液作为粗酶液,通过优化DEAE-Sephadex弱阴离子交换层析、Q-Sepharose强阴离子交换层析、SP-Sepharose强阳离子交换层析等方法,得到电泳纯级别的花脸香蘑漆酶,SDS-PAGE检测显示为单一条带,根据标准蛋白曲线得出该漆酶的分子量为58.5 kDa。结合不同截留分子量超滤管超滤结果,确定花脸香蘑漆酶为单亚基蛋白,分子量为58.5 kDa,将其命名为Lac-LS。3.通过对Lac-LS内部肽段序列进行测序,得到488条肽段序列,其中三条肽段序列（SLELVLGPGLGASGPHPFHLHGHTLSPYR、QAGTFWYHSHGLSTQYCDGLR、GPVGVTQCPLSPSHSFLYK）位于漆酶保守区,说明纯化的目的蛋白是漆酶。通过测定Lac-LS的N-末端序列,得到其N-末端部分氨基酸序列为:A I G P I A D L H I,与其他真菌漆酶N端序列高度同源。将上述得到的488条内部肽段序列和N端序列分别与由花脸香蘑基因组序列预测得到的蛋白质数据库进行BLASTP比对,经对比分析预测出编码Lac-LS的基因为gene4851。经分析,该基因编码的漆酶含有13个内含子和13个外显子,与其他真菌漆酶中的内含子数目相近,编码漆酶的分子量为57 kDa,等电点pI为6.0,GRAVY值为-0.076,推测该漆酶为亲水蛋白。通过保守结构域分析,该基因编码的漆酶具有典型真菌漆酶的3个domain,即Cu-oxidase₃,Cu-oxidase和Cu-oxidase₂。4.通过测定Lac-LS的理化性质,得出:该漆酶最适温度为60℃;最适pH值为3.0;在50℃-60℃范围内具有良好的温度耐受性,60℃处理60 min后残余相对酶活为60%以上;Lac-LS在酸碱度为pH 3.0-pH 5.0范围内具有良好的耐受性。金属离子对花脸香蘑漆酶有一定的影响:Zn²⁺、Al³⁺对漆酶活性有抑制作用,且随着浓度升高抑制作用逐渐增强,Mn²⁺、Cu²⁺在0.625 mM时对漆酶有轻微促进作用,在2.5 mM和5 mM时有抑制作用;铁离子在1.25 mM以下有明显的抑制作用,在5 mM有明显的促进作用,Na⁺、K⁺、Mg²⁺对漆酶活性作用不明显。5.在同等漆酶活力的条件下,比较Lac-LS和发酵液对染料（甲基红、甲基橙、铬黑T、考马斯亮蓝）的降解效果,发现Lac-LS对染料的降解率都达到粗酶液对染料降解率的50%以上,说明在粗酶液对染料的降解中漆酶起到了主要的降解作用。然后使用较高漆酶活力（2000 U/mL）的Lac-LS进行染料的降解研究,结果显示Lac-LS对甲基红、甲基橙和考马斯亮蓝3种染料的降解率均达到90%左右,对铬黑T的降解率达到80%。接着使用更高酶活力的Lac-LS（3000 U/mL）降解甲基红和甲基橙染料,使用HPLC进行检测,结果发现这两种染料能够被完全降解。以上研究成果,为花脸香蘑漆酶的酶学特性研究及在染料废水中的应用方面提供科学依据,具有一定的研究价值。