论文部分内容阅读
为探究茶多酚(tea polyphenols,TPs)对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)生长、碳水化合物(CHO)代谢及肝脏转录组的影响,在基础饲料中分别添加0(对照组)、250、500、1000、2000、4000 mg/kg 的 TPs,进行 8 周养殖试验。结果显示,TPs对草鱼摄食率(FR)无显著影响(P>0.05),但能不同程度地提高饲料转化效率(FCE),其中500mg/kg TPs显著提高了饲料转化效率,从而提高了特定生长率(SGR)(P<0.05)。TPs对全鱼的水分、灰分、粗蛋白和粗脂肪含量均无显著影响(P>0.05)。随着TPs增加,丙酮酸激酶(PK)活性变化无明显趋势,在250mg/kg和500mg/kg时显著高于对照组(P<0.05);乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性呈先上升后下降趋势,在250mg/kg～1000mg/kg范围内均显著升高(P<0.05)。TPs对胰岛素(INS)含量无显著影响(P>0.05),但显著降低了肌糖原和肝糖原含量(P<0.05),且各TPs组之间无显著差异。取对照组与500 mg/kg TPs组草鱼肝脏进行RNA-seq分析,共鉴定出1209个上调基因和 714 个下调基因(qvalue<0.05,|log2Foldchange|>1)。筛选 qvalue<0.001,且|log2Foldchange|>1的差异基因并进行GO富集和KEGG富集分析。前30个显著富集(qvalue<0.05)的 GO terms 中,细胞过程(Cellular process)、代谢过程(Metabolic Process)、单一有机体过程(Single-organism process)、细胞器(Organelle)、细胞(Cell)、催化活性(Catalytic activity)和结合(Binding)等GO terms均富集到大量差异基因。前20条显著富集(qvalue<0.05)的KEGG通路中,12条通路一级分类属于代谢,包括CHO代谢、脂类代谢和氨基酸代谢;代谢通路(Metabolicpathways)富集到的差异基因数量最多,淀粉与蔗糖代谢通路(Starch and sucrose metabolism)和半乳糖代谢(Galactose metabolism)2条通路的富集程度最高。在显著富集(qvalue<0.05)的KEGG通路中,共有胰岛素信号通路(Insulin signaling pathway)、淀粉与蔗糖代谢通路(Starch and sucrose metabolism)、糖酵解通路(Glycolysis pathway)、磷酸戊糖通路(Pentose phosphate pathway)等 8 个 CHO 代谢相关通路。上述通路中,糖原磷酸化酶(PYG)和蔗糖-异麦芽糖酶(SI)等基因表达上调,葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)基因表达下调,促进了糖原分解代谢;葡萄糖激酶(GK)、丙酮酸激酶(PK)、6-磷酸果糖激酶(PFK)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)和果糖二磷酸醛缩酶A(ALDOA)等基因表达上调,促进了葡萄糖分解代谢。经qRT-PCR分析,上述CHO代谢相关基因的表达差异性与RNA-seq结果一致。结果表明,适量TPs可使草鱼肝脏中CHO代谢相关基因差异表达,提高CHO相关代谢酶活性,加强鱼体糖原的分解利用,提高CHO利用率,从而改善了饲料转化效率,促进了草鱼生长;TPs适宜添加范围在250 mg/kg～1000 mg/kg,本研究中最适添加量为500 mg/kg。