【摘 要】
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本研究分离筛选了一株产纤维素酶的芽抱杆菌ws-6,优化了该菌株的产酶发酵条件,初步研究了酶学性质,并进一步优化了菌株的发酵条件,结果分述如下:菌株分离筛选及鉴定从乌苏窖
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本研究分离筛选了一株产纤维素酶的芽抱杆菌ws-6,优化了该菌株的产酶发酵条件,初步研究了酶学性质,并进一步优化了菌株的发酵条件,结果分述如下:菌株分离筛选及鉴定从乌苏窖藏饲料中分离筛选出6个产CMCase的菌株,以代号ws-6的菌株产酶水平最高,通过形态学、生理生化指标及16S rDNA序列比对,鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。菌株最适生长pH值为5.0~7.0,最适生长温度35℃,产CMCase活力达2.55U/mL。菌株产酶条件及酶学性质经碳、氮源及微量元素的筛选实验和正交实验分析,最适合菌株ws-6产CMCase的发酵培养基组成为(g/L):葡萄糖15g、CMC-Na 5g、酵母膏15g、KH2PO40.5g、NaCl 5g。发酵产酶的最适初始pH值为6.5,最适培养温度为35℃,最适装液量30mL(250mL三角瓶)。对菌株ws-6的酶学性质进行初步研究表明:酶反应的最适pH值为5.0,最适温度为50℃,最适底物浓度为0.6%,最适反应时间为20min。菌株发酵条件优化经碳、氮源及微量元素的筛选实验和正交实验分析,确定ws-6菌株发酵培养基的最佳组分为(g/L):蔗糖60g、蛋白胨30g、NaCl 30g、K2HPO4 2 g、MgSO4 1 g、FeSO4 0.02 g、MnSO4 0.01 g。对发酵条件进行了研究,发酵的最适初始pH值为5.5,最适培养温度为35℃,最适装液量为10mL(250mL三角瓶),通过优化培养基组分和培养条件后,菌株ws-6活菌数达到了6.58×1010 CFU·mL-1。
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