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目的:初步探讨Kissoone B改善睡眠机制及对帕金森果蝇的作用。方法:1.采用戊巴比妥钠协同睡眠实验,以雄性小鼠作为研究对象,根据小鼠翻正反射的状态,考察Kissoone B协同阈上剂量戊巴比妥钠对小鼠睡眠潜伏期和睡眠持续时间的影响;考察Kissoone B协同阈下剂量戊巴比妥钠对小鼠睡眠发生率的影响。2.应用酶联免疫吸附试剂盒,检测给予Kissoone B后小鼠前额叶皮质、海马和下丘脑中5-HT、5-HIAA含量和5-HIAA/5-HT 比值。3.应用酶联免疫吸附试剂盒,检测给予Kissoone B后小鼠前额叶皮质、海马和下丘脑中GLU的含量。4.应用酶联免疫吸附试剂盒,检测给予Kissoone B后小鼠前额叶皮质、海马和下丘脑中 DA、DOPAC、HVA 的含量和 DOPAC/DA、HVA/DA、(DOPAC+HVA)/DA的比值。5.用鱼藤酮造成帕金森果蝇模型,检测给予Kissoone B后果蝇的攀爬能力。结果:1.Kissoone B各剂量组均有缩短小鼠睡眠潜伏期的趋势,其中高剂量组有统计学意义(P<0.05)。同时,Kissoone B各剂量组使小鼠的睡眠时间显著延长,其中,低剂量组和中剂量组显效(P<0.05),高剂量组效果显著(P<0.01)。Kissoone B各剂量组与空白组相比较均能延长小鼠的睡眠发生率,其中,给药中剂量组(P<0.05)和高剂量组(P<0.01)均有统计学意义。验证了黑水缬草中Kissoone B改善睡眠作用的药效。2.Kissoone B给药组在小鼠海马脑区部位5-HT的浓度显著升高(P<0.05),导致小鼠海马脑区部位5-HIAA的浓度显著升高(P<0.05),而对前额叶皮质区和下丘脑中的5-HT和5-HIAA浓度无统计学影响(P>0.05]。对小鼠各脑区5-HIAA/5-HT 比值均无显著影响。实验结果表明Kissoone B可以提高海马中5-HT浓度并加快其在海马中的代谢,但不能提高5-HT神经系统的兴奋性。3.Kissoone B给药组在小鼠前额叶皮质和下丘脑脑区中GLU浓度显著降低(P<0.05),而海马中GLU浓度虽然有降低趋势,但无显著性差异。结果表明,Kissoone B影响睡眠作用机制一方面可能是通过抑制皮层下激活系统谷氨酸神经元兴奋性,另一方面降低食欲素神经元的兴奋性,抑制大脑的唤醒作用。4.Kissoone B给药组在小鼠前额叶皮质和海马脑区部位多巴胺浓度显著降低(P<0.05),而下丘脑中多巴胺浓度虽然有降低趋势,但无显著性差异。Kissoone B给药组使小鼠前额叶皮质脑区DOPAC浓度显著升高(P<0.05)且DOPAC/DA 比值显著升高(P<0.01),而海马和下丘脑中DOPAC浓度和DOPAC/DA 比值均无显著性差异。Kissoone B给药组对小鼠各脑区HVA和HVA/DA均无显著影响;对前额叶皮质和海马中(DOPAC+HVA)/DA 比值有显著影响,对下丘脑中(DOPAC+HVA)/DA 比值无显著性差异。实验结果表明,Kissoone B通过调节DA在神经元细胞内的代谢,发挥镇静催眠的作用。5.中剂量组雄性和高剂量组雄性果蝇在给药后攀爬时间显著降低,攀爬能力显著提高(P<0.01)。高剂量组雌性果蝇在给药后攀爬时间降低,有统计学意义(P<0.05)。其余各给药组有改善果蝇攀爬能力的趋势,但无统计学意义。结论:Kissoone B通过提高GLU在皮质和下丘脑中浓度;兴奋海马中5-HT并加快其在海马中的代谢;增强DA在神经细胞内的代谢率来发挥镇静催眠的作用。Kissoone B能够显著增强PD果蝇的攀爬能力。