世界各国脊髓损伤（SCI）的发生率大约是15-40例／百万人／每年。国内由于经济建设的迅猛发展，脊髓损伤的发生率有增高的趋势。多数是年轻人，后果往往是终生残疾。如何促进神经功能的恢复已经成为基础及临床研究的热点。 在临床上脊柱骨折伴脊髓损伤的减压术一直被公认为是治疗脊髓损伤的有效方法之一。但是其机理目前尚没有完全明了。 目前SCI后的病理生理学过程正在被逐步阐明，SCI主要可分为原发性损伤和继发性损伤。其预后是二者共同作用的结果。原发性损伤只能预防，继发性损伤是源自原发性损伤并由此带来的一系列分子及生物学反应，其原因有细胞毒、自由基损伤、炎症、细胞因子、细胞凋亡等，细胞凋亡是其中的重要因素之一，已经有许多的实验研究和临床研究发现脊髓损伤后存在神经细胞凋亡的现象。由于SCI后细胞经历了一程序性死亡的过程即凋亡，这就给我们带来了挽救细胞于凋亡的极好机会。 凋亡细胞是以核内染色质的凝聚，核的皱缩及DNA的碎片化为特征的。TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl-transferase-mediated deoxyuridine triophosphate-biotin nick end labeling）即是一项被用于验证DNA碎片化的技术，也是检测凋亡的经典方法。凋亡的调控成员主要由bcl-2相关蛋白组成，而后者由多种成员组成。有些是促进凋亡的（如bcl-Xs，bax和bad），而另一些是抑制凋亡的（如bcl-2，bcl-X1），这些蛋白质的相对水平决定了细胞死亡是还是存活。Bax与Bad蛋白则通过另一组蛋白起作用—Caspases，而后者又包括了十几种蛋白。Caspases是一组半胱氨酸蛋白酶，其激活可以引起细胞的最终死亡。这些调控蛋白的存在又可以用来印证凋亡的现象。 既往的研究并没有持续压迫伤凋亡的变化规律以及减压后神经细胞凋亡的相关研究，减加介次掌博士学位论文篡压术是否通过促进凋亡细胞的恢复，从而促进神经功能的恢复呢?本文试从细胞凋亡的角度来阐明这一问题。 研究方法 1脊髓损伤模型的制备:采用螺钉压迫法，取78只成年SD大鼠（购自浙江大学医学院实验动物中心），重量300一00克，雄性。苯巴比妥钠麻醉（50m叭g，i.p）。手术野消毒后，逐层切开，暴露椎板，用牙科磨钻于TIO水平做椎板减压术，钻入平头螺钉一枚，直径2^，长度2^{尾部增大以防止螺钉钻入过深}，螺距0.1^，速度缓慢，以出现压迫水平以下躯体及尾巴轻微的抽搐为度，表明建模成功。逐层缝合伤口，大鼠自然苏醒。 2分组:随机分成4组。一组为6小时压迫后减压组，一组为24小时压迫减压组，一组为持续压迫组，另一组是空白对照组，每组各6只。分别于减压术后1d、3d、7d、30d处死动物。 3行为学测试: 采用BBB（Basso一Beattie一Bresn血an loeomotive rating seale）评分系统，测试减压术后ld、3d、7d、30d及同期持续组的评分。 4组织病理学: 腹腔麻醉后，经左心室灌注固定，依次0.9%生理盐水15分钟，4%甲醛30分钟。切取以损伤平面为中心的15^脊髓组织块，置于4%甲醛中4℃冰箱后固定，时间24一48小时，常规制作蜡块，分别是头段、损伤段及尾段共3段。 横断面切片，厚4微米，作H.E，TuNEL，casPase一3抗体，bel一2乃ax染色。 统计学方法l、SPSS 11.0 forwindows。2、one way ANovA，P<0.05为有显著性差异。3、Inieraetive graphs for analysis。 结果 3组术后BBB评分比较分析来看，术后3，7，30天，6小时组的BBB评分就大于持续组且有显著性差异;术后7，30天，6小时组和24小时组的BBB评分均大子持续组且有显著性差异。TUNEL染色: 将脊髓横断面分成前束（anterio:。ofunm，Ae），侧束（lateral eolunm，LC），后束（posterioreolunm，Pe），前角（anterio:horn，斌）（神经元脚1，胶质细胞AHZ），后角（posterio:horn，PH）（神经元PHI，胶质细胞PHZ）。OLYMPUS BX51光学显微镜镜下分别进行计数。加声，次掌博士学位论文暴 三组均在伤后1天出现凋亡细胞，以后逐渐增多，6h组的凋亡高峰均在7天时，而24小时组和持续组的凋亡高峰提前，部分计数区域高峰在3天，部分区域高峰在7天时，然后逐渐减少，伤后30天时仍然可以见到凋亡细胞。 从头端3组各计数区域凋亡细胞比较分析来看，术后1天时，在ahl，持续组的凋亡细胞大于6小时组和24小时组，有统计学差异。术后3天时，在ae，曲2，le，pe，phZ持续组和24小时组的凋亡细胞大于6小时组，且有统计学差异。 从损伤段3组各计数区域凋亡细胞比较分析来看，术后3天时，在ac，持续组的凋亡细胞大于6小时组和24小时组且有统计学差异。在ahZ，lc，持续组的凋亡细胞>24小时组>6小时组，且组间均有统计学差异。在Pc持续组的凋亡细胞大于6小时组，且有统计学差异。在phZ持续组和24小时组的凋亡细胞分别大于6小时组，且有统计学差异。术后7天，在ac，ahl，lc，phl，phZ持续组的凋亡细胞大于24小时组，且有统计学差异。在ah2持续组的凋亡细胞大?