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目的:作为食物中具有的天然毒素,黄曲霉毒素对动物有很大的威胁性,其会损伤动物机体的肝脏、肾脏等组织,严重的会导致动物发生癌症。黄曲霉毒素B1(AFB1)是黄曲霉毒素中最为危险也是被研究最为广泛的,被国际癌症研究机构列为一类致癌物质。由于目前尚未出现AFB1的特异解毒剂,因此探寻能够降低AFB1对机体引起的毒性的方法是研究热点。由于益生菌的益生特性,被越来越多的人用于研究对真菌毒素的解毒效果。因此,本研究拟以本实验室分离鉴定的解淀粉芽孢杆菌B10为研究对象,探究其是否能够对AFB1诱导的小鼠肾损伤具有缓解作用及其作用机制。方法:本试验将56只6周龄雄性昆明小鼠,随机分成4组,每组14只。分别为Control组、AFB1组、AFB1+B10组和B10组,对小鼠进行灌胃饲养。Control组灌胃LB培养液;AFB1组灌胃AFB1工作液、AFB1+B10组灌胃B10工作液+AFB1工作液、B10组灌胃B10工作液,其中AFB1和B10都以LB培养液为载体,对小鼠进行灌胃。灌胃28天后,对小鼠进行安乐死,眼球采血后离心收集血清,检测小鼠肾脏功能指标UA、BUN及CRE。获取新鲜的肾脏组织,用生理盐水冲洗,摘除其上多余的脂肪部分。进行称重,用以小鼠脏器比系数的测定。挑选部分新鲜肾脏组织,用4%的多聚甲醛进行固定后进行HE染色和Tunel检测。余下肾脏组织切碎,放入-80℃的冰箱中冻存。用于MDA、GSH-PX、SOD及CAT的氧化应激指标检测和Western Blot检测(Nrf2、HO-1、PTEN、AKT、P-AKT、Keap-1、Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9)。结果:1.小鼠脏器比系数结果表明,与Control组相比,AFB1组的小鼠脏器比系数极显著增加(P<0.01);与AFB1组相比,AFB1+B10组的小鼠肾脏脏器比系数降低(P<0.01)。结果表明,B10能够有效的缓解AFB1造成的肾脏损伤。2.小鼠血清学检测结果表明,与Control组相比,AFB1组的UA、BUN及CRE血清学指标的含量极显著升高(P<0.01);与AFB1组相比,AFB1+B10组的小鼠UA、BUN及CRE血清学指标含量降低(P<0.01)。结果表明,B10能够有效的缓解AFB1诱导的小鼠肾脏血清学变化。3.氧化试剂盒检测结果表明,与Control组相比,AFB1组的MDA含量极显著升高(P<0.01),GSH-PX、SOD及CAT的活力极显著降低(P<0.01);与AFB1组相比,AFB1+B10组的MDA含量降低(P<0.01),GSH-PX、SOD及CAT的活力显著升高(P<0.01)。结果表明,B10可以有效的抑制AFB1诱导的肾脏氧化应激损伤。4.病理组织切片结果显示,AFB1组小鼠的肾脏组织出现了肾间质充血;肾小管出现空泡样病变;肾小管上皮细胞肿胀坏死,脱落的上皮细胞形成细胞管型;肾小囊囊腔间隙较Control组增宽;肾脏组织出现了严重的颗粒性病变及大面积出血。B10处理后,小鼠的肾脏出血现象减少。结果表明,B10能够改善AFB1造成的肾脏损伤。5.Tunel检测结果表明,与Control组相比,AFB1组的肾脏组织凋亡细胞数量极显著增加(P<0.01);与AFB1组相比,AFB1+B10组的肾脏组织凋亡细胞数量极显著减少(P<0.01)。结果表明,B10能有效的抑制AFB1诱导的细胞凋亡。6.Western Blot检测相关蛋白结果看出,Nrf2/HO-1信号通路的结果显示,与Control组相比,AFB1组的Nrf2蛋白表达量极显著降低(P<0.01);HO-1蛋白表达量显著降低(P<0.05);Keap-1蛋白表达量极显著升高(P<0.01)。细胞凋亡信号通路的结果显示,与Control组相比,AFB1组的AKT、P-AKT及Bcl-2的蛋白表达量显著降低(P<0.05);PTEN、Bax、Caspase-9及Caspase-3的蛋白表达量极显著升高(P<0.01)。B10处理后,这一结果发生了逆转(P<0.01;P<0.05)。结果表明,B10可以调控Nrf2/HO-1和细胞凋亡信号通路保护小鼠肾脏组织免受AFB1诱导的氧化损伤和细胞凋亡。结论:解淀粉芽孢杆菌B10对AFB1诱导的雄性小鼠肾脏损伤具有拮抗作用,解淀粉芽孢杆菌B10可以通过Nrf2/HO-1和细胞凋亡通路有效降低AFB1诱导的小鼠肾脏组织损伤。