白腐菌高效降解竹材木质素的工艺条件研究

来源 :重庆大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:SCY512355337
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自然界中,木质素是在数量上仅次于纤维素的天然高分子化合物,木质素的生物降解研究表明,白腐菌是目前唯一能在纯系培养中将木质素降解为CO2和H2O的一类微生物,故利用白腐菌选择性降解木质素是目前生物技术研究中的热点。本文选用Phanerochaete chrysosporium、Trametes cinnabarina和Pleurotus ostreatus的组合菌作为实验菌种,采用竹材基质为固态发酵体系。为筛选理想的实验菌株,通过对3株白腐菌的组合菌在竹材基质上的生长及木质素、纤维素降解状况比较,确定了一组木质素选择性降解能力强的菌株——三菌种的组合菌作为木质素降解研究菌株。研究了不同培养条件(温度,pH值,营养液与竹材质量百分比)和不同添加物(H2O2,苯甲醇)对木质素降解的影响,探讨白腐菌高效降解竹材木质素的最佳工艺条件。不同培养条件对基质中木质素降解和选择性系数影响不同。白腐菌在四组不同培养温度(24℃,27℃,30℃,33℃)下固态发酵,结果表明:锰过氧化物酶(简称MnP)和木质素过氧化物酶(简称LiP)在30℃时活性最高,分别为225 U/L和810 U/L,漆酶(简称Lac)在33℃时活性最高,达139 U/L,木质素降解率在30℃时最高,达46.6%,木质素选择性系数为4.16。进一步研究了四组不同pH值(pH值2.5,pH值3.5,pH值4.5,pH值5.5)对木质素降解的影响,结果表明:Lac和LiP在pH值为3.5时活性最高,分别达150 U/L和1180 U/L,MnP在pH值为4.5时活性最高,达350 U/L,木质素降解率在pH值为3.5时最高,达48.6%,木质素选择性系数为5.46。探索四组不同营养液与竹材质量百分比(50%,80%,110%,140%)对木质素降解的影响,结果表明:Lac、MnP和LiP都在营养液与竹材质量百分比为110%时活性最高,分别为160 U/L、360 U/L、1100 U/L,木质素降解率也最高,达50.2%,木质素选择性系数为4.67。添加四组不同浓度H2O2(0.001%,0.01%,0.1%,1%)后,可以提高木质素降解酶活性,促进木质素降解。Lac活性在添加H2O2浓度为0.1%时活性最高,从对照组的160 U/L上升到210 U/L,MnP和LiP在添加H2O2浓度为1%时活性最高,分别从对照组的320 U/L上升到550 U/L和1000 U/L上升到1450 U/L,木质素降解率在添加H2O2浓度为1%时最高,从对照组的44.2%上升到58.6%,木质素选择性系数从3.95上升到5.14。添加四组不同浓度苯甲醇(0.001%,0.01%,0.10%,1%)后,Lac和LiP活性在添加苯甲醇浓度为0.1%时活性最高,分别从对照组的160 U/L上升到260 U/L和1000 U/L上升到1500 U/L,MnP在添加苯甲醇浓度为1%时活性最高,从对照组的320 U/L上升到430 U/L,木质素降解率在添加苯甲醇浓度为0.10%时最高,从对照组的47.23%上升到59.5%,木质素选择性系数从4.1上升到4.84。以上研究结果表明:在培养温度为30℃,pH值为3.5,营养液与竹材质量百分比为110%,添加H2O2的浓度为1%,添加苯甲醇浓度为0.1%,三种白腐菌组合培养时酶活最高,木质素降解效果最好,为白腐菌降解木质素的最佳工艺条件。
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