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背景:骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic proteins BMPs)是大家所熟知的具有调节骨和软骨形成的基因,不仅如此,BMPs与肿瘤血管生成有着密不可分的关系。BMPs不仅直接调节血管内皮细胞,也间接影响多种血管因子的表达。目的:通过改变肝癌HepG2细胞中骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein2,BMP-2)的表达,观察与其共培养的人脐静脉内皮细胞HUVECs的增殖、迁移及血管生成能力并探索其潜在的分子机制。方法:1.构建上调BMP-2的慢病毒及下调BMP-2的慢病毒,并通过qRT-PCR及Western Blot验证上调慢病毒的效率及筛选出有效的下调片段组。设置组别分别为:CON组、LV-SH-CON组、LV-SH-BMP-2-A、LV-SH-BMP-2-B组,LV-SH-BMP-2-C组、overexpression-LV-BMP-2组、overexpression-LV-CON组。2.将不同分组的慢病毒转染到HepG2细胞,并与HUVECs内皮细胞共培养,得到不同分组的HUVECs,3.用CCK-8检测共培养后内皮细胞的增殖能力,并描绘其生长曲线。4.用Transwell、划痕实验检测共培养后内皮细胞的迁移能力。5.用成管实验观察共培养后内皮细胞的血管生成能力6.Western blot检测各组HepG2细胞中P38,ERK和Akt/m-TOR信号通路的表达情况。结果:1.qRT-PCR及Western Blot结果发现overexpression-LV-BMP-2组中BMP-2蛋白表达水平高于overexpression-LV-CON组(P<0.01)。与LV-SH-CON组相比,LV-SH-BMP-2-A、LV-SH-BMP-2-B组,LV-SH-BMP-2-C组中LV-SH-BMP-2-C组的BMP-2抑制效率最显著(P<0.01),并将LV-SH-BMP-2-C组用于后续实验,重新命名为LV-SH-BMP-2组。2.CCK-8实验显示:相比于LV-SH-CON和CON,LV-SH-BMP-2组增殖能力明显抑制,而LV-SH-CON和CON之间没有显著差异。(P<0.05)。overexpression-LV-BMP-2组增殖能力明显高于overexpression-LV-CON和CON(P<0.05)。3.Transwell实验中,LV-SH-BMP-2组的HUVECs内皮细胞穿膜数明显少于LV-SH-CON和CON(P<0.05)。而overexpression-LV-BMP-2组穿膜细胞数多于overexpression-LV-CON和CON(P<0.05)。4.划痕实验中,与LV-SH-BMP-2组的HUVEC内皮细胞愈合速度明显慢于与LV-SH-CON组及与正常HepG2共培养后的HUVEC内皮细胞(CON)(P<0.05),然而,LV-SH-CON与CON组无明显差异(P>0.05)。反之,与过表达BMP-2的HepG2细胞共培养后,HUVECs的愈合速度显著增快(P<0.05)。5.成管实验显示LV-SH-BMP-2组HUVECs内皮细胞的血管生成能力低于CON组及LV-SH-CON(P<0.05)。overexpression–LV-BMP-2组的血管生成能力强于overexpression-LV-CON和CON组(P<0.05)。6.Western blot显示:增强或者抑制BMP-2后,可以激活或者抑制P38,ERK和Akt/m-TOR信号通路的表达。结论:这些结果表示BMP-2可以通过P38,ERK和Akt/m-TOR信号通路促进肝癌中内皮细胞的增殖、迁移、血管生成能力。