紫锥菊(Echinacea purpurea L.)是目前发现的少数具有免疫增强和抗炎两种功效的药用植物之一,有很高的药用价值和极大地发展前景。虽然,紫锥菊在世界许多国家和地区均有引种栽培,但有关其多倍体的研究资料并不多。本实验室运用生物技术方法获得了有稳定的生物学特性的四倍体紫锥菊,并揭示出四倍体紫锥菊不仅根和根状茎中生物量比二倍体紫锥菊大,且四倍体紫锥菊中烷基酰胺类和菊苣酸含量也高于二倍体紫锥菊。紫锥菊具有良好的免疫功能,其中多糖是重要的免疫活性组分。遗憾的是有关四倍体紫锥菊中紫锥菊多糖含量和免疫活性的研究依然缺乏。因此,本研究通过对四倍体和二倍体中紫锥菊多糖粗提物中多糖含量和组成成分的研究,通过体内外实验,采取MTT法和ELISA法测定正常小鼠与环磷酰胺导致的免疫低下小鼠的脾淋巴细胞增殖及免疫因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)及肿瘤坏死因子-α(IFN-α)的分泌,比较四倍体与二倍体紫锥菊中多糖粗提物免疫作用的不同。主要结果和结论如下:1.四倍体紫锥菊多糖粗提物的多糖含量比二倍体紫锥菊更高。采用改良的苯酚-硫酸法测定两种倍性紫锥菊多糖粗提物的糖含量,结果显示四倍体紫锥菊多糖粗提物的糖的含量为85.51%,二倍体紫锥菊多糖粗提物中糖含量为44.65%,RSD<2%。2.通过NMR和GPC色谱研究显示四倍体和二倍体紫锥菊多糖之间的结构和分子量没有差异。结果表明,染色体倍性的增加没有导致新的紫锥菊多糖的合成,但增加了紫锥菊多糖的原始积累量。3.紫锥菊多糖粗提物免疫体外实验结果显示四倍体紫锥菊多糖粗提物(EP4)和二倍体紫锥菊多糖粗提物(EP2)均能显著增强Con A刺激的正常小鼠的脾淋巴细胞增殖和细胞因子IL-2和IFN-γ的分泌(p<0.05),且EP4在低浓度0.0312mg/m L的条件下就能够最大程度刺激对淋巴细胞增殖及细胞因子IL-2和IFN-γ的分泌,而EP2在浓度为0.1250mg/m L时才能够最大程度刺激小鼠淋巴细胞分泌和IL-2和IFN-γ的分泌;4.紫锥菊多糖粗提物免疫体内实验结果表明EP4和EP2均能显著增强环磷酰胺所致免疫低下小鼠的脾淋巴细胞增殖及细胞因子IL-2、IFN-γ和IFN-α的产生(p<0.05),与此同时EP4对环磷酰胺所致免疫低下小鼠脾淋巴细胞的增殖及分泌细胞因子IL-2、IFN-γ和IFN-α的作用高于同一浓度的EP2。综上所述,倍性增加导致紫锥菊多糖含量升高,但并没有导致新的多糖成分合成。EP4和EP2均能促进小鼠脾淋巴细胞增殖及IL-2、IFN-γ、和IFN-α的分泌,但EP4的免疫促进作用显著高于EP2。因此,四倍体紫锥菊具有更强的免疫调节作用。