【摘 要】
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该文通过规模化测序,从人胎脑cDNA文库中分离克隆了一个新的全长cDNA,编码一分子量36kDa的蛋白质.该基因现命名为dok5.多组织Nothern杂交显示:人源dok5在骨骼肌中表达最高,在
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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该文通过规模化测序,从人胎脑cDNA文库中分离克隆了一个新的全长cDNA,编码一分子量36kDa的蛋白质.该基因现命名为dok5.多组织Nothern杂交显示:人源dok5在骨骼肌中表达最高,在心脏和大脑中也有表达,而鼠源dok5只特异地表达于脑.dok家族蛋白现已发现dok1-5五个成员,dok1-3特异表达在血液来源细胞,它们对细胞增殖都有负调节作用,其中dok1、2是通过与rasGAP结合抑制MAP激酶通路的;dok4表达广泛;dok5主要在骨骼肌、心脏和大脑中表达,不与rasGAP结合,对细胞增殖具正调节作用.该文克隆表达了dok1和dok5蛋白,并表达纯化了dok1和dok5的PTB结构域.经Biacore实验发现,dok1 PTB结构域可特异识别来自Ret的磷酸肽,但不与Shc和Irs1 PTB识别的TrkA和IL-4R磷酸肽结合;dok5 PTB结构域与三种磷酸肽都不结合.为了发现dok PTB结构域识别底物的结构基础,该文用纯化的dok1和dok5的PTB结构域重组蛋白得到了各自的蛋白晶体和dok1PTB结构域与Ret磷酸肽的复合物晶体,并用Se原子多波长反常散射法(MAD)成功地解析了它们各自的三维结构,用分子置换法解析了复合物的结构.这些结构所提供的精确信息为我们进一步深入研究dok蛋白在信号传导中的作用奠定了基础.
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