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小干扰RNA基因治疗去势前列腺癌具有良好的前景,阳离子聚合物纳米材料作为一种新型的肿瘤基因治疗载体,为其应用于临床带来了希望。在本研究中,我们合成一个新型的纳米聚合物聚乙二醇化的聚乙烯亚胺(mPEG-PEI),作为一个有效的非病毒基因载体,发现此共聚物能够成功转染EZH2-shRNA基因至前列腺癌PC3细胞株,并在细胞中稳定表达。前期的研究证明IEZH2 (Enhancer of zeste homolog 2)与去势前列腺癌的形成、发展密切相关。转入EZH2-shRNA基因降低癌细胞中EZH2mRNA蛋白表达可能有效治疗难治性去势前列腺癌CRPC (Castration Resistant Prostate Cancer)。mPEG-PEI/质粒DNA复合物显示着低细胞毒性和较高的基因转染效率。mPEG-PEI作为一个很具前景的的非病毒基因载体,能够成功转染EZH2-shRNA至目的前列腺癌细胞PC3,这为晚期前列腺癌的治疗带来新的希望。方法：1.聚乙二醇化的聚乙烯亚胺(mPEG-PEI)纳米凝胶的合成及表征。2.测定PEG-PEI/质粒DNA复合物的粒径和电荷；琼脂糖凝胶电泳阻滞实验测定复合物结合能力；细胞毒性实验以及红细胞聚集实验测定mPEG-PEI的细胞毒性及转染效率,细胞转染实验选择最佳转染效率时的N/P(聚合物上的氮原子比DNA上的磷原子)比,研究聚乙二醇化的聚乙烯亚胺(mPEG-PEI)作为基因载体的性质。3.体外转染EZH2-shRNA基因至前列腺癌细胞PC3细胞并获得稳定表达,然后用RT-PCR、Westen blot方法证实EZH2-mRNA蛋白的表达情况,用以检测转染EZH2-shRNA基因后的基因抑制效应。结果：1.成功合成和表征共聚物mPEG-PEI。2.随着N/P比增大1mPEG-PEI与DNA结合更牢固,N/P=10,复合物能够完全结合。3.在不同的聚合物浓度及不同的N/P比值复合物的细胞毒性不同。随着mPEG-PEI/pDNA复合物浓度的增高,PC3细胞的死亡率增大。当浓度大于50謬g/ml,细胞毒性明显增加,PC3死亡率大于50%。同时随着N/P比值增大细胞毒性也增大,当N/P低于50时候,显示出比较小的细胞毒性。当N/P比值为3和20时候,细胞的存活率为94.13±3.42%和78.6±3.94%,细胞毒性较小。然而,N/P比值大于50时,细胞毒性明显增加。此外,不同N/P比,复合物对红细胞聚集能力不同。4. mPEG-PEI/pDN A中N/P比值增大基因转染效率相应增高。N/P比值3增大到20时,转染效率从12.10±1.61%增加到64.67±3.92%。mPEG-PEI/pDNA中N/P比值为20时获得最高的的转染效率。5.N/P比值20的mPEG-PEI/pDNA成功转入PC3活性细胞并获得稳定表达,PCR和western blot分析EZH2-mRNA基因表达结果显示PC3细胞转入mPEG-PEI/pDNA后,EZH2-mRNA的表达明显降低。EZH2-shRNA基因具有有效的抑制前列腺癌细胞中EZH2蛋白的表达效应。结论：1.mPEG-PEI具有转染效率较高而细胞毒性小的特性；mPEG-PEI/pDNA转染效率与复合物浓度以及N/P比密切相关,且不同N/P比细胞毒性也不同。2. mPEG-PEI成功介导转染EZH2-shRNA至前列腺癌细胞PC3,抑制EZH2 mRNA的表达可用于晚期前列腺癌的治疗。