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弯曲菌是一类常见的食源性肠道病原菌。感染弯曲菌常会引起肠炎,导致腹泻、发热以及腹绞痛等症状产生;也会导致反应性关节炎,菌血症,脑膜炎等并发症。近年来,畜牧业生产中广泛使用抗生素药物,导致弯曲菌耐药性持续提升,如果弯曲菌获得了对临床上关键抗菌药物的耐药性,那么很可能导致临床上治疗病人使用药物种类的减少,甚至治疗失败。本研究在2017年从天津某养殖场采集猪肛门拭子200份,鸡盲肠150份;2018年8月从青海某养殖场中采集鸡盲肠60份,鸡肉样本55份。两地区共采集样本465份,共分离出弯曲菌109株,分离率为23.4%。包括结肠弯曲菌73.4%(80/109),空肠弯曲菌26.6%(29/109)。在265份鸡源样本中,弯曲菌分离率为35%(93株);在200份猪源样本中,弯曲菌分离率为8%(16株)。对分离出的109株弯曲菌进行药敏试验,结果发现天津、青海两地区空肠弯曲菌和结肠弯曲菌对萘啶酸、环丙沙星的耐药率相对较高。天津、青海两地区对四环素的耐药率最高,高达99%,且空肠弯曲菌和结肠弯曲菌对四环素的耐药率较为一致。在天津、青海两地区空肠弯曲菌和结肠弯曲菌对阿奇霉素、红霉素、庆大霉素、克林霉素的耐药率都不相同。在天津空肠弯曲菌对阿奇霉素、红霉素、庆大霉素、克林霉素的耐药率依次为12.5%(1/8)、12.5%(1/8)、62.5%(5/8)、25%(2/8);结肠弯曲菌对阿奇霉素、红霉素、庆大霉素、克林霉素的耐药率依次为93.3%(56/60)、93.3%(56/60)、76.7%(46/60)、90%(54/60);由此可见在天津地区结肠弯曲菌对阿奇霉素、红霉素、庆大霉素、克林霉素的耐药比率要高于空肠弯曲菌。青海地区空肠弯曲菌对阿奇霉素、红霉素、庆大霉素、克林霉素的耐药率依次为33.3%(7/21)、33.3%(7/21)、57.1%(12/21)、5%(1/21);结肠弯曲菌对阿奇霉素、红霉素、庆大霉素、克林霉素的耐药率依次为5%(1/20)、5%(1/20)、25%(5/20)、5%(1/20);青海地区空肠弯曲菌对阿奇霉素、红霉素、庆大霉素、克林霉素的耐药率要高于结肠弯曲菌。天津地区分离弯曲菌的多重耐药率高于青海地区,其多重耐药率达92.6%,而青海地区多重耐药率为41.5%。本研究中gyrA基因的检测结果表明共有107株弯曲菌含有gyrA基因,107株弯曲菌含有gyrB基因,没有弯曲菌含有parC基因。107株弯曲菌均含有gyrA基因的Thr-86-Ile位点突变,无其他错义突变形式存在。gyrB基因上存在多个点突变,但都为同义突变,不改变氨基酸的序列。大环内酯类耐药弯曲菌的23S rRNA基因A2074和A2075的检测结果表明,有47株弯曲菌含有A2075G突变,所有大环内酯类耐药弯曲菌均不含A2074C突变。因此23S rRNA基因上A2075G突变是大环内酯类耐药弯曲菌的主要耐药机制。对核蛋白体大亚基中L4和L22的基因进行PCR检测,均无突变。大环内酯类抗生素耐药弯曲菌有20株含有ermB基因,且含有ermB基因的20株弯曲菌都具有多重耐药性。对氨基糖苷类抗生素耐药的63株弯曲菌进行PCR方法检测,共检测出26株弯曲菌含有aadE-sat4-aphA-3耐药基因簇。65株弯曲菌耐药菌株的RFLP分型结果表明弯曲菌具有高度的基因多样性。不同地区间弯曲菌菌株间亲源关系不同,天津地区分离的弯曲菌要比青海地区弯曲菌的亲源关系更加密切。对35株弯曲菌耐药菌株进行MLST分型结果表明不同地区弯曲菌流行状况不同,有19株在数据库中未能得到现有的序列型(ST),为新型ST。其余16株的ST型以ST825、ST354、ST860为主,其中天津地区以ST825、ST860为主,青海地区以ST354为主。