内皮分化受体Edg4和Edg1的基因克隆研究

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人们在克隆人Edg4受体基因的过程中,则发现从正常人体胎盘总DNA、人卵巢上皮腺癌细胞株3A-O和CaoV-3的总DNA和cDNA库、人红细胞白血病细胞株的cDNA库中扩增出的Edg4基因,以及以人卵巢上皮腺癌细胞株SK-OV-3的总DNA为模板扩增出的带有内含子的Edg4基因,都是Edg4受体基因的一个新亚型.人们从人红白血病细胞的cDNA库及人胎盘总DNA中获得的Edg1受体基因与文献报道不同,由于750-751的碱基倒置以及随后插入了"CGC"三个碱基,使该区域编码的氨基酸发生相应变化,它是人们发现的Edg1受体基因的一个新亚型.为了在哺乳动物细胞中表达及筛选Edg1、Edg4受体基因,人们分别在这两个基因的5端添加了作为识别标志的flag片段,并将改造后的这两个基因分别克隆到哺乳动物表达型载体pCIneo上.
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