硫化物对桃果实抗病性和成熟衰老的调控作用研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heqigao
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桃果实属于呼吸跃变型果实,采后成熟软化快,易遭受病害侵染引起贮藏和物流中的大量损失。因此,需要寻求安全的手段减少桃果实采后损失。硫化氢(H2S)和亚牛磺酸(HT)两种硫化物处理果实后无残留毒性,本研究以蒙阴“蜜桃王”为原料,经NaHS(硫化氢供体)和亚牛磺酸(HT)两种含硫化合物处理,从采后病理的角度研究两种硫化物对褐腐菌菌斑直径、孢子萌发率和致病力的影响以及控制果实病斑扩展和发病率的效果。从生理和分子角度探讨两种硫化物对采后蒙阴桃果实苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanineammonialyase,PAL)、几丁质酶(Chitinase,CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GNS)的活性,以及对与防御酶合成相关基因表达量的影响,筛选出合适的硫化物。用其处理蒙阴桃果实,通过测定与抗氧化相关酶活性和内源硫化氢含量探讨硫化物控制采后桃果实褐腐病的机理。并从生理角度探讨了硫化物延缓肥城桃果实(“莱山蜜”)成熟衰老的机制,为硫化物在果实采后应用提供技术支持和理论依据。主要研究结果如下:(1)用浓度为25、50、75、100mmolL-1的NaHS以及浓度为0.1和1.0mmolL-1的HT处理褐腐菌的菌丝和孢子,并回接到果实上,观察病原菌的致病力。结果发现,四个浓度的NaHS都可以抑制褐腐病的菌斑直径、孢子萌发率和致病力,50mmolL-1NaHS熏蒸可以较好地抑制菌斑直径和致病力。而0.1和1.0mmolL-1HT的HT对褐腐病的菌斑直径、孢子萌发率和致病力没有抑制效果。(2)分别用50mmolL-1NaHS熏蒸以及0.1mmolL-1的HT浸泡蒙阴桃果实2h,接种浓度为5×105个孢子mL-1的褐腐菌孢子悬浮液,于24、48、72h观察桃果实的发病率和病斑直径。结果表明,50mmolL-1NaHS在果实发病前期可以抑制果实病斑直径和发病率,而HT抑制效果相对较好。50mmolL-1NaHS和0.1mmolL-1的HT处理的桃果实在2h、12h、24h、48h和72h用液氮进行取样,测定防御酶活性,包括PAL、CHI和GNS的活性。并通过荧光定量PCR(qRT-PCT)筛选出两种相对稳定内参基因,用于与防御酶合成相关基因表达量的测定。结果表明,两种硫化物都可以提高三种防御酶活性以及防御酶相关基因的表达量,HT处理能较好提高果实防御酶活性和基因表达量。(3)用0.1mmolL-1的HT处理蒙阴桃果实后接种褐腐菌,测定H2S含量和抗氧化相关酶活性,包括超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)、多酚氧化酶(Polyphenoloxidase,PPO)和过氧化物酶(Peroxidase,POD)。结果表明,HT处理可以提高蒙阴桃果实体内的硫化氢含量,同时提高与抗氧化相关的酶的活性,推测HT或许可以通过提高果实内源H2S含量和抗氧化相关酶活性而提高其抗病性。(4)用0.1mmolL-1的HT处理肥城桃果实后,放入0°C冷库贮藏,发现HT可以延缓褐变指数的上升和硬度的下降,相比对照,HT可以抑制呼吸强度,减少乙烯含量,同时HT推迟桃果实呼吸高峰和乙烯释放高峰出现,有利于维持较高的维生素C含量,和较低的可溶性固形物(TSS)含量。而处理后的果实超氧化物歧化酶、多酚氧化酶、过氧化物酶的活性高于对照,说明HT对果实品质不仅没有消极影响,而且还提高了肥城桃果实抗氧化能力,延长了肥城桃果实在0°C下的贮藏时间。
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