Rett综合征（Rett syndrome,RTT）是一种严重的神经系统发育障碍疾病,该病主要是由MECP2基因突变导致。有大约80%左右的RTT患者存在多种睡眠问题,这对患儿和其所在家庭的健康及正常生活均造成极大困扰。随着研究的不断深入以及实验技术的不断进步,许多不同的分析方法被用于睡眠表型的识别,例如脑电图（EEG）,活动记录法（Actigraphy）和视频记录法（Videography）等。同时也已陆续报道了许多与睡眠节律高度相关的影响因素,例如外界光照环境和血液中褪黑素浓度等。良好的动物模型为进一步深入了解疾病的发病机制提供了良好途径,随着基因编辑技术的不断发展和非人灵长类动物模型的兴起,Chen等人基于TELAN基因编辑技术建立了MECP2基因编辑的RTT综合征非人灵长类动物模型,为进一步研究RTT综合征的睡眠障碍发病机制提供了新的研究思路。本实验的主要内容和结果如下:第1部分:非人灵长类动物睡眠状态分析。我们在考虑到不同睡眠评估方法的差异性,并结合非人灵长类动物的独特特征,采用Actigraphy和Videography两种常用的睡眠评估手段比较了10只食蟹猴在连续7个夜晚的睡眠情况,对两种方法得到的睡眠评分进行比较,并验证在睡眠记录中使用Actigraphy的可靠性。结果表明与Videography方法相比,Actigraphy方法在评估深度睡眠时是可靠的,但在识别过渡睡眠和清醒状态时表现较差,因此仍需找到一种可以将睡眠状态划分更为精细的实验技术手段。第2部分:RTT模型猴睡眠障碍机制研究。EEG结合EMG可以将睡眠状态细化为REM和NREM睡眠,这是Actigraphy和Videography方法所无法提供的。我们随机选择了3只RTT模型猴与2只WT对照猴进行试验。首先通过猴子体内植入式无线遥测装置,量化其睡眠结构,并探讨了RTT猴子睡眠障碍的潜在机制。我们发现RTT猴子在睡眠时长,REM睡眠和清醒时长方面表现出明显的睡眠障碍。而且,RTT猴子无论环境光如何变化都表现出睡眠障碍。然后,我们比较了不同时期睡眠相关基因的表达,发现RTT猴子的核心昼夜节律基因表达发生了改变。我们使用ELISA来测量可的松和褪黑激素的血清水平,结果表明RTT猴子没有异常。RTT猴子的活动和体温的昼夜节律也没有明显异常。我们使用LC/MS探究了脑脊液中神经递质和氨基酸的昼夜节律振荡,发现两组之间神经递质的释放水平不同。我们的研究表明,MECP2突变可能会干扰与睡眠有关的基因表达和神经递质的节律,并与RTT猴子的睡眠障碍有关。结论:本研究验证了不同睡眠评价方法在非人灵长类动物睡眠研究中的应用价值,同时研究发现MECP2基因突变的RTT综合征模型猴具有与临床患者一致的睡眠问题,包括显著的睡眠节律紊乱特别是REM睡眠问题,这进一步证实了非人灵长类动物在睡眠医学研究中的独特优势与价值。并通过EEG记录、改变外界光照环境,检测基因表达节律、激素节律和神经递质等一系列实验探索模型猴的睡眠障碍机制,为后续机制研究和治疗研究提供有力的支持。