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枇杷为蔷薇科植物,富含抗氧化、抗肿瘤、降血脂等多种生物活性物质。枇杷叶多酚是近年来备受关注的药源活性物质之一,已经成为该领域研究热点。本工作从枇杷叶提取多酚组份,并进行改善胰岛素抵抗活性研究。本论文研究了溶剂种类、浓度、料液比、提取温度、提取时间等因素对枇杷叶多酚提取量的影响,并采用正交设计法优化提取条件。在优化条件下(70%乙醇、固液比1/15、40℃、浸提2 h),提取2次,提取量为9.9 mg/g枇杷叶干基。采用大孔吸附树脂柱层析对多酚粗提物进行分离纯化,确定分离纯化条件为:上样浓度1.5 mg/mL、体积6 BV、流速1.5 BV/h、洗脱液70%乙醇、流速1.5 BV/h、洗脱体积2 BV,最终得到的枇杷叶多酚纯度为65.38%。通过测定对β-胡萝卜素亚油酸氧化体系抑制能力,评价枇杷叶多酚的体外抗氧化能力,其中IC50为0.91mg/mL。采用AAPH诱导人主动脉血管内皮细胞(human aorta endothelial cell,HAEC)氧化应激模型,评价枇杷叶多酚细胞水平抗氧化能力。确定了较优的AAPH诱导浓度为5 mmol/L;同时确定了多酚安全作用浓度为:10、20和30μg/mL。结果表明,枇杷叶多酚在30μg/mL具有明显的抑制HAEC细胞氧化应激作用,能够有效降低细胞的ROS水平。枇杷叶多酚具有良好的体外和细胞水平抗氧化作用。采用高胰岛素浓度诱导对HAEC细胞胰岛素抵抗模型,确定了胰岛素最佳诱导浓度为10-6mol/L。在此基础上考察枇杷叶多酚改善HAEC细胞胰岛素抵抗作用,在10-30нg/mL范围内,对HAEC胰岛素抵抗细胞具有明显改善作用,能够有效提高细胞的葡萄糖消耗量。通过定量PCR和Western Blot法初步研究其可能的作用机理。结果表明:与模型组相比,枇杷叶多酚能一定程度上调IRS-1、PI3K、PDE3B的mRNA表达水平,以及一定程度上调IRS-1、PI3K、GLUT4的蛋白表达水平。用高脂饲料诱导C57BL/6小鼠胰岛素抵抗模型,考察枇杷叶多酚体内抑制胰岛素抵抗作用。OGTT实验表明枇杷叶多酚高剂量组、低剂量组(400 mg/kg、200 mg/kg)均可有效改善小鼠糖耐量状态;ITT实验表明枇杷叶多酚可显著提高小鼠的胰岛素敏感性。枇杷叶多酚还能有效降低小鼠脂肪指数。与模型组相比,多酚高低剂量组小鼠血清中的ALT、AST水平明显降低;HDL水平升高、LDL水平降低,TC、TG水平降低;肝组织GSH水平升高、肝组织MDA水平降低。组织化学HE染色结果显示脂肪细胞脂肪泡变小。