【摘 要】
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目的:探讨趋化因子受体CXCR7、E-钙黏蛋白(E-Cadherin)和波形蛋白(Vimentin)在结直肠癌细胞株中的表达情况,并通过核酸干扰靶向技术沉默CXCR7基因,检测CXCR7对结肠癌细胞E-Cadherin
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目的:探讨趋化因子受体CXCR7、E-钙黏蛋白(E-Cadherin)和波形蛋白(Vimentin)在结直肠癌细胞株中的表达情况,并通过核酸干扰靶向技术沉默CXCR7基因,检测CXCR7对结肠癌细胞E-Cadherin和Vimentin的影响。方法:1.采用正常人结肠细胞株FHC和结肠癌细胞株HCT-116、LOVO、COLO-205、CACO-2进行研究,通过real-time PCR和Western blot技术分别检测细胞中CXCR7、E-Cadherin、Vimentin基因和蛋白的表达情况,并选出侵袭性较强的结肠癌细胞株进行下一步实验。2.通过脂质体(lipofectamineTM2000)作为荧光标记的siRNA载体转染LOVO细胞和COLO-205细胞,并计算倒置荧光显微镜下的转染效率。化学合成CXCR7基因siRNA序列,以最佳转染条件转染细胞后,分别采用real-time PCR以及Western-blot法再次检测E-Cadherin、Vimentin表达情况。结果:1.趋化因子受体CXCR7、E-Cadherin和Vimentin在实验所用细胞株中均有表达;CXCR7和Vimentin在结直肠癌细胞株表达明显高于正常结直肠细胞株(P <0.05);E-Cadherin在结直肠癌细胞株的表达低于正常结直肠细胞株(P <0.05)。2.转染CXCR7-siRNA的结直肠癌细胞株Vimentin的基因和蛋白表达明显下降(P <0.05),而E-Cadherin的基因和蛋白表达增多(P <0.05)。结论:CXCR7基因在结直肠癌细胞中高表达,沉默CXCR7基因能使E-Cadherin表达增多,Vimentin表达减少。提示CXCR7-siRNA可能影响结直肠癌细胞株中EMT的发生和发展。
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