论文部分内容阅读
铁线莲属(ClematisL.)植物多为多年生藤本,是国际上著名的高档观赏花卉,覆盖率和生长速度表现突出,但该属植物繁殖系数成活率低,无性繁殖中扦插和压条的成活率也较低,导致生产成本居高不下,制约铁线莲的推广和发展。本研究采用组织培养的方式来进行探索,以铁线莲’BlekitnyAniol’(’蓝天使’)和’Rooguchi,(’紫铃铛’)为研究对象,通过带芽茎段及愈伤组织诱导途径,优化不同品种组织培养方法,建立其再生体系,并寻找适宜铁线莲控制成本的生产模式,核算并比较,建立适宜工厂化育苗的快繁体系,为其园林实际应用及推广提供现实可行性,研究结果如下:1.’BlekitnyAniol’组织培养及再生体系建立带芽茎段快繁体系建立茎段和带芽茎段最佳消毒时间为7 min,叶片最佳消毒时间为5 min;诱导侧芽的培养基为MS基本培养基;腋芽萌发的初代培养基MS+1 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA;增殖培养基:1/2MS+3 mg/L 6-BA+0.01 mg/LNAA 与壮苗培养基:MS+0.1 mg/L TDZ+0.05 mg/L NAA交替使用,提高其生长速度;生根培养基:1/2MS+0.05 mg/L NAA,生根率为70.22%;移栽基质为蛭石、珍珠岩和园土比例按1:1:2的体积比搭配使用,成活率达到89.27%,植株生长旺盛。愈伤组织分化不定芽体系建立诱导茎段愈伤组织培养基:MS+2 mg/L 6-BA +0.01 mg/L NAA,诱导率为78.33%;诱导叶片愈伤组织的培养基:MS+2mg/L6-BA+0.05mg/L2,4-D,诱导率为92.0%;愈伤组织增殖培养基:MS+0.1 mg/L TDZ+0.1 mg/LNAA,增殖倍数为3.47;愈伤组织分化培养基:1/2MS+0.15mg/LTDZ,分化率为63.89%,平均不定芽数可达11,且生长状态良好。2.’Rooguchi’组织培养及再生体系建立带芽茎段快繁体系建立带芽茎段最佳消毒时间为7 min,叶片和茎段最佳消毒时间为5 min;诱导侧芽培养基为MS 培养基;腋芽萌发的初代培养基:MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/LNAA;腋芽增殖培养基:MS+0.01 mg/LTDZ+0.1 mg/LNAA;在此培养基中添加0.5g/L活性炭,可以有效抑制褐化现象;生根培养基:MS+0.01mg/L2,4-D+1mg/L6-BA,生根率为63.33%;移栽基质为蛭石:珍珠岩:园土比例按1:1:3的体积比搭配使用,成活率达到76.93%,植株生长状态较好。愈伤组织分化不定芽体系建立诱导茎段愈伤组织培养基:MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/LNAA,诱导率为83.33%;诱导叶片愈伤组织培养基:MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,诱导率为68.33%;愈伤组织增殖培养基:MS+0.05 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT,增殖倍数为3.45;愈伤组织分化培养基:MS+3 mg/L 6-BA+0.01 mg/L 2,4-D,分化率为 41.67%。3.两种铁线莲组培苗工厂化生产的成本研究培养容器以240ml果酱玻璃瓶替代三角瓶,自来水替代蒸馏水,白砂糖替代常规的蔗糖,其中适宜’Blekitny Aniol’生长的白砂糖浓度是20 g/L,琼脂浓度为5 g/L,适宜’Rooguchi’生长的白砂糖浓度是30g/L,琼脂浓度为6g/L。在生根阶段,蛭石和砂均可替代琼脂,其中蛭石在培养’BlekitnyAniol’时成活率最高为90.0%,砂在培养’Rooguchi’时成活率最高为87.67%。在不考虑劳动力、设备、管理等费用的前提下,同样培养75 d时,’Blekitny Aniol’的成本可降低为原成本的26.54%,’Rooguchi’的成本可降低为原成本的33.13%,降低的成本幅度与培养时间呈正相关。