论文部分内容阅读
DCT015是一个新Sorafenib衍生物。山东绿叶制药有限公司非临床研究部前期研究结果表明 DCT015在多个体外和体内肿瘤模型筛选试验中显示了较好的抗肿瘤活性。我们推测基于母核结构，DCT015可能保留部分索拉菲尼的机制，本研究旨在考察DCT015的抗胃癌作用和它潜在的分子作用机制，实验内容主要包括药效学研究和药代动力学研究两个部分。 药效学实验分别研究了化合物对增殖、凋亡、血管新生三个方面的影响。首先应用细胞毒性分析、细胞凋亡分析以及流式细胞术分析考察了DCT015对人胃癌细胞株AGS和BGC823的增殖、凋亡以及细胞周期的影响；应用细胞毒性分析、伤口愈合试验、内皮细胞成管试验分析 DCT015对血管新生的影响；应用AGS体内移植瘤裸鼠模型考察 DCT015的体内抑制肿瘤增殖活性；应用蛋白印迹分析和免疫组化分析检测DCT015对肿瘤细胞增殖、凋亡、血管新生相关蛋白和信号传导通路的影响。药代动力学实验建立了 LC-MS/MS法用于测定大鼠血浆中DCT015和Sorafenib的浓度，研究了两种药物在大鼠体内的药代动力学行为。 研究结果表明，DCT015表现出了较好的抗肿瘤活性，药物作用一定时间后，呈剂量依赖性抑制AGS和BGC823细胞增殖，凋亡阳性细胞数显著增加，且细胞周期阻滞在sub-G1期；DCT015可以抑制VEGF诱导的内皮细胞增殖、迁移和微管样结构的形成。体内荷瘤模型，每日灌胃给予DCT015可显著抑制瘤体积和瘤重的增长。蛋白印迹分析显示，DCT015可以抑制VEGFR2的磷酸化，进而阻断 Raf/MEK/ERK和 PI3K/Akt/mTOR信号通路。此外，可以通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1，上调促凋亡蛋白Caspase3和Bax影响细胞凋亡。同时我们对两个化合物的药动学行为进行了研究和比较，采用了液质联用的方法检测灌胃给药后DCT015和索拉菲尼的血药浓度，灌胃给予30 mg/kg的同等剂量后，结果显示DCT015的AUC约为Sorafenib的1.20倍，Cmax约为Sorafenib的1.19倍，两者显示了相似药代动力学特征和生物利用度。 综上所述，我们证明了DCT015是一个具有与索拉菲尼相似的体外药理活性和药代动力学行为，但体内药效更佳抗胃癌活性的化合物，其作用机制可能是抗增殖、诱导凋亡和影响血管新生。因此，DCT015是一个有潜力的口服抗胃癌化合物，但需要进一步的临床前研究和临床研究。