论文部分内容阅读
本文通过表面活性剂-蛋白质相互作用在乙醇溶剂体系中采用Spans对猪胰酯酶（Porcine Pancreas Lipase，PPLipase）进行了修饰，并研究了修饰PPLipase在溶剂体系和无溶剂体系中催化酯交换的行为及S60-PPLipase在溶剂体系中催化酯交换反应的动力学。Spans修饰PPLipase的条件为：对Span20来说，无水乙醇与水的比例为1:4（v/v），Span20用量为25%；对Span40来说：无水乙醇与水的比例为1:2（v/v），Span40用量为20%；对Span65来说，无水乙醇与水的比例为1:1（v/v），Span65的用量为20%；对Span60、Span80和Span85来说，无水乙醇与水的比例为1:3（v/v），用量均为20%，Spans修饰的搅拌时间均为30min。在此条件下得到的Spans修饰的PPLipase在溶剂体系中催化酯交换的活性在30℃～70℃是PPLipase的1.5～2倍。Span60修饰PPLipase的效果优于其它五种表面活性剂。对Spans和蛋白质的互相作用进行分析探究。溶剂体系中Spans修饰的PPLipase和PPLipase催化茶油与棕榈酸进行酯交换的研究表明：与相同条件下PPLipase催化的酯交换反应相比，Spans修饰的PPLipase均可以提高反应酯交换量，且在相同的酯交换量下酰基位移率比PPLipase催化的反应低。S60-PPLipase催化酯交换反应的效果最佳。加酶量对S60-PPLipase催化溶剂体系酯交换的研究结果表明：50℃和70℃时最佳加酶量均为25%，此时，酯交换速率较快（2h就可达到反应平衡），酯交换量在25%左右，酰基位移在3%以下。无溶剂体系Spans修饰的PPLipase和PPLipase催化茶油与亚油酸进行酯交换的研究结果表明：与相同条件下PPLipase催化的酯交换反应相比，只有S40-PPLipase和S60-PPLipase在30℃、50℃和70℃下可以提高反应酯交换量，且在相同的酯交换量下酰基位移率不高于PPLipase催化的反应。无溶剂体系中S60-PPLipase催化酯交换反应的效果最佳。加酶量对S60-PPLipase催化无溶剂体系酯交换的研究结果表明：30℃和50℃时最佳的加酶量为15%；70℃时最佳的加酶量为20%。根据反应底物物料平衡建立了溶剂体系中S60-PPLipase催化三油酸甘油酯与棕榈酸进行酯交换的动力学模型，推导出反应体系中各个成分浓度与反应速率和反应时间的关系方程。计算出反应的平均速率常数K=6.95×10-5[L2/(mmol·h·g酶)]。并且对预测值进行了验证，验证发现预测值和验证值吻合良好。