海参是一种营养价值很高的海洋动物,但其极强的自溶能力会带来巨大的经济损失。本论文以海参的体腔细胞为研究对象,考察海参在自溶过程中体腔细胞钙离子信号与内质网损伤的研究。由于海参本身没有免疫系统,其个体的免疫应激反应主要依靠体腔细胞的免疫作用来完成,因此研究体腔细胞在海参自溶过程中的细胞免疫学特性具有重要意义。钙离子作为一个主要的细胞内信使,参与并调控许多细胞和组织的生理活动,包括新陈代谢、肌肉收缩、分泌以及细胞分裂,因此本实验主要研究钙离子在海参自溶过程中的变化,以期对海参自溶的机理做一些基础研究。本论文利用透射电子显微镜观察海参体腔细胞在海参自溶过程中的微观结构变化包括细胞的凋亡特征结构及内质网的损伤情况,结合流式细胞仪从统计学上检测细胞凋亡率在自溶过程中的变化;最后通过钙离子荧光探针结合流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测紫外线诱导海参自溶过程钙离子的浓度变化并且检测与钙离子运输相关的内质网上的钙泵Ca²⁺—ATP酶活力的变化;钙离子的超载也是引起细胞凋亡的重要启动因子,本研究发现海参自溶过程中存在钙离子超载的现象并且体腔细胞内的钙离子浓度随自溶时间的延长而升高;在海参自溶过程中体腔细胞凋亡率逐渐升高,新鲜海参体腔细胞的凋亡率低于5%而自溶4h的海参凋亡率高达20%;内质网损伤情况越来越严重,自溶4h后内质网基本溶解;推测细胞凋亡途径可能是由内质网损伤导致的,为内质网途径引起的细胞凋亡。