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背景与目的:在各种中枢神经系统疾病,如颅脑损伤、脑卒中、癫痫、退行性疾病中,均伴有不同程度的神经炎症反应。炎性因子促进炎症反应的发生发展,炎症反应中又会产生炎性因子。星形胶质细胞是脑内数量最多的一大类细胞群体,在神经炎症反应中星形胶质细胞活化并起着重要作用。分泌型磷脂酶A2属于磷脂水解酶家族中的一类,它与炎症密切相关。本研究旨在探索大鼠大脑皮质星形胶质细胞的分离、纯化和体外培养的方法,并研究在炎性因子作用下,星形胶质细胞的活性变化以及其产生的sPLA2-ⅡA表达量的变化,进一步探讨其可能存在的机制。方法:在体外原代培养大鼠大脑皮质星形胶质细胞的基础上,取第4代培养的细胞用于实验。随机分为对照组和实验组。实验组分别为:10ng/ml IL-1β组,100ng/ml IL-1β组,10ng/ml TNF-α组,100ng/ml TNF-α组,10ng/ml IL-1β加10ng/ml TNF-α组,100ng/ml IL-1β加100ng/ml TNF-α组。24小时后用CCK-8检测细胞活力。再选取10ng/ml IL-1β加10ng/ml TNF-α组继续进行实验。通过实时荧光定量PCR和ELISA,检测IKKα、IKKβ、NF-?B、p65和sPLA2-ⅡA等的表达量变化。结果:通过分离、纯化获得了形态典型的大鼠大脑皮质星形胶质细胞。细胞形态不规则,突起较多较长,呈放射状。GFAP免疫染色显示纯度达95%以上。实验组细胞的活性均高于对照组。其中,100ng/ml IL-1β组、100ng/ml TNF-α组、10ng/ml IL-1β加10ng/ml TNF-α组和100ng/ml IL-1β加100 ng/ml TNF-α组的细胞活性明显高于对照组,有统计学意义(P<0.05,P<0.001,P<0.001,P<0.001)。10ng/ml IL-1β加10ng/ml TNF-α组与对照组相比,sPLA2-ⅡA在mRNA和蛋白水平表达量显著升高,有统计学意义(P<0.05)。NF-?B在mRNA和蛋白水平表达量在10ng/ml IL-1β加10ng/ml TNF-α组明显高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,10ng/ml IL-1β加10ng/ml TNF-α组的IKKα、IKKβ和p65的表达量均增高,有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05)。结论:当受到炎性因子刺激时,星形胶质细胞活化同时sPLA2-ⅡA表达增高,很可能是通过IKKα/IKKβ-NF-?B-sPLA2-ⅡA途径产生的。