纳米含氟羟基磷灰石/聚乳酸复合支架材料的生物相容性研究

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纳米HA/高分子复合材料通过对骨组织的模仿,成功的解决了普通HA抗弯强度低、脆性大、在生理环境下抗疲劳性不好等临床应用中遇到的问题,因此在骨组织工程中有着广阔的应用前景。纳米HA/聚乳酸复合支架材料可以模拟出与人体组织相似的细胞基质微环境,使种植的细胞保持良好的活性和增殖能力,是目前组织工程学研究的重点内容之一。而羟基磷灰石(HA)的一个特性就是其晶体内的羟基可被氟置换,即含氟羟基磷灰石(Ca10(PO4)6Fx(OH)2-x, FHA)。已有报道证实涂覆于金属材料表面的FHA可以促进细胞粘附和细胞碱性磷酸酶的表达。FHA的这个特性使纳米FHA与PDLLA复合的多孔可降解材料作为新型的骨组织工程支架成为可能。良好的生物相容性是纳米FHA/PDLLA可作为骨组织工程支架的前提,本文通过体外和体内实验对纳米FHA/PDLLA的生物相容性进行了评价,并确定了该支架中最适于细胞生长和骨组织修复的含氟量。我们利用溶剂浇铸/粒子沥滤技术制备出含氟量分别为0.25、0.5、0.75、1.0和1.6的纳米FHA/PDLLA多孔支架,然后将Wistar乳鼠颅盖骨源性成骨细胞在不同含氟量的复合支架上进行体外培养,通过选择电极法测定不同含氟量的支架释放的氟离子的量;MTT法测定细胞增殖曲线;pNPP法检测细胞ALP活性;Bradford蛋白测定法检测活细胞蛋白质含量,并通过SEM和H&E染色观察细胞在支架上的粘附和伸展以及分布情况。体外实验结果表明纳米F0.25HA/PDLLA在细胞相容性实验研究中表现出促成骨细胞增殖和分化的作用,具有良好的细胞相容性。为了进一步研究纳米F0.25HA/PDLLA在体内的修复作用,本实验将纳米F0.25HA/PDLLA植入大鼠颅骨极量骨缺损部位,结果显示纳米F0.25HA/PDLLA植入大鼠颅骨缺损部位后,诱导周围成骨细胞附着于植入材料表面并进行增殖分化,开始骨形成过程,且纳米F0.25HA/PDLLA对碱性磷酸酶活性有促进作用,从而启动钙化,使类骨质钙化形成骨组织,使植入材料与周围骨组织及早建立骨性结合,为后期修复打下良好基础。因此可以说明纳米F0.25HA/PDLLA是一种有发展前途的骨组织工程支架材料。
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