甘蓝迟抽薹基因的RAPD标记及种质资源的筛选

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甘蓝是一种世界性蔬菜,由于其具有适应性广,耐寒性强和一定的耐热性等特点,因此在引入我国后发展很快,分布也很广。但近些年来,由于气候条件的反常、栽培方式的变更,甘蓝未熟抽薹的现象时有发生,为解决这一问题,最经济有效的手段就是培育出迟抽薹甘蓝品种。本试验是利用混合分离群体法(Bulked Segregant Analysis,BSA)将F2群体中研究的抽薹性状的个体分为两组,构建两DNA池,然后利用RAPD标记分析,在两个混合池之间寻找与甘蓝迟抽薹基因连锁的分子标记,并利用该标记来鉴定22份甘蓝材料的抗抽薹性。本试验具体得出如下结论:1. 以亲本抗抽薹材料C和亲本易抽薹材料F在春化处理后的抽薹时间为标准,确定了F2群体在春化处理后,抽薹情况是,早抽薹植株:中间型:晚抽薹植株为1:2:1,因此得出了甘蓝的抽薹性状虽然为数量性状,但在迟抽薹基因中可能存在一个类似于质量性状的主效基因。2. 通过亲本C、F对105条随机引物进行筛选,共有87个引物获得了扩增产物,出现的谱带总数为592条。从中选出具有多态性的引物共19条,其中在两DNA池中扩增出条带清晰,重复性、多态性好的引物只有一条即N1。N1引物在两DNA池之间扩增出一差异片段N1-750,经DNA池的各单株及F2两极端群体的单株检测,N1-750确实与甘蓝迟抽薹基因相连锁,连锁距离为7.9cM。3. 用筛选出来的19个引物对22份材料进行RAPD分析,其中6个引物扩增出的条带清晰,重复性好,共得到44条多态性条带。经UPGMA聚类分析,以遗传距离0.627为阈值,将供试的22份材料聚为七类。4. 用已标记出的连锁基因N1-750验证了材料a、b、c和d为抗抽薹材料,u和v属于易抽薹材料,同时鉴定出e、g、i、j、k和m属于抗抽薹材料。
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