F-box蛋白FBXO39在胃癌中的表达情况及生物学作用

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目的:FBXO39在胃细胞系中的表达情况及其生物学作用。方法:1、Western blot和细胞免疫荧光技术检测FBXO39在正常胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞SGC-7901及MGC803细胞系中的表达情况。2、MTT、平板克隆形成实验、细胞划痕实验检测FBXO39过表达对胃癌细胞SGC-7901增殖和迁移的影响。3、流式细胞术检测FBXO39过表达对胃癌细胞SGC-7901细胞周期的影响。结果:1、FBXO39在胃癌细胞系中的表达水平高于正常胃细胞系。体外培养胃正常上皮细胞GES-1、胃癌细胞株SGC7901和MGC803,用Western blot检测及细胞免疫荧光检测发现FBXO39在胃癌细胞SGC7901和MGC803中的表达水平要高于正常胃上皮细胞GES-1,并且SGC7901更明显高于正常GES-1。提示FBXO39在胃癌中扮演一定角色。2、FBXO39过表达可促进胃癌细胞SGC-7901的增殖。MTT结果显示:FBXO39组相对于control组的相对增值率在147%-182%之间,并明显高于其他两组(P<0.05),提示SGC7901细胞转染p EGFPFBXO39后,可促进细胞的增殖。同时我们在细胞转染后通过平板克隆实验进行检测SGC7901细胞克隆形成能力,实验提示:过表达FBXO39细胞集落形成率为:23.7±0.9,明显高于空白组9.6±0.6、PEGFP-C2空载体组8.7±0.5、PEGFPFBXO39?F7.7±0.5(P<0.05)。两组实验都提示过表达FBXO39可胃癌SGC-7901细胞增殖。3、FBXO39过表达可促进胃癌细胞SGC-7901的迁移。我们采用细胞划痕实验进一步分析FBXO39在SGC7901细胞迁移能力的影响,结果提示:FBXO39组24小时的迁移率约69.7%,48小时的迁移率约90.2%,而其他三组24小时迁移率约45-47%左右,48小时的迁移率在58-61%左右,实验数据经ANOVO及LSD分析提示FBXO39组迁移率明显高于其他组(P<0.05)。这些结果进一步提示过表达FBX039可促进SGC7901细胞迁移。4、FBXO39过表达对胃癌细胞SGC-7901周期无明显的影响。流式细胞术结果显示:FBXO39质粒组细胞G0/G1期、S期、G2/M期值分别约:47.42±2.29、35.91±1.87、35.91±1.87,与其他组相比,细胞周期各期没有发生显著的变化(P>0.05)。结论:1、FBXO39在胃癌细胞株中的表达水平高于胃正常细胞株。2、FBXO39过表达可促进胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移。3、FBXO39过表达对胃癌SGC-7901细胞周期无明显影响。
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