目的：建立血清和饮料（葡萄酒、啤酒、葡萄汁、橙汁）中18种游离氨基酸（天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、丝氨酸、精氨酸、甘氨酸、苏氨酸、脯氨酸、丙氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、酪氨酸）的反相高效液相色谱分析方法。 方法：血清样品经偏磷酸沉淀蛋白，饮料样品经高速离心后，在碱性条件（pH9.0）下游离氨基酸与2，4-二硝基氯苯在90℃水浴中避光反应1.5h，生成具有紫外吸收的衍生产物，用反相C₁₈柱分离，紫外检测器检测，内标法或外标法定量。分析条件：色谱柱：Phenomenex（USA），C₁₈（ODS）柱，5μm，250×4.6mm；柱温为40℃；流动相A为乙腈，B为乙酸-乙酸钠缓冲液（pH5.20）；梯度洗脱；流速1.0ml／min；检测波长360nm。 结果：用内标法或外标法测定18种氨基酸的标准曲线的相关系数范围均为0.9951～0.9999；相对标准偏差（RSD）为1.39％～4.67％；血样的检出限为0.20～7.72μg／ml，饮料样品的检出限为0.16～5.86μg／ml；血清加标回收率为65.9％～118％，饮料加标回收率为56.3％～125％。 结论：应用建立的方法成功地测定了血清、葡萄酒、啤酒、橙汁、葡萄汁等30份样品中的游离氨基酸。本法具有快速简便、准确度灵敏度较高、重现性好的特点，适合于血清和多种饮料中游离氨基酸的测定。