携带ApoJ基因的骨髓间充质干细胞治疗大鼠脑出血模型的研究

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目的:探讨携带ApoJ基因的骨髓间充质干细胞对大鼠实验性脑出血的治疗作用。方法:采取脂质体介导用重组质粒pEGFP-N1-apoJ转染体外培养的骨髓间充质干细胞(BMSCs),分别于转染后24,48,72,96h在荧光显微镜下观察相同体积脂质体介导不同重组质粒量的转染效果,筛选出转染率最高的转染组。将102只雄性SD大鼠随机分为转染组、BMSCs组和NaCl组。每组再分为24h,48h,72h,96h四个亚组。利用脑立体定位仪建立大鼠脑出血模型,三组分别于造模24h后颅内注射等体积的转染细胞悬液、BMSCs悬液和生理盐水,分别于处理后24h,48h,72h,96h处死各对应亚组大鼠。进行各时间点改良神经功能评分(mNSS);用干湿质量法测量脑组织含水量;用蛋白免疫印迹法检测载脂蛋白-J在各时间点的表达。结果:1.等体积脂质体条件下,四个细胞转染组(重组质粒量分别为0.8、1.2、1.6、2.0)在72h时转染率高于同组在24h,48h,96h的转染率(P均<0.05);且与另外三个细胞转染组(重组质粒量分别为0.8、1.2、2.0)比较,重组质粒量为1.6的细胞转染组在72h时荧光表达最强,转染效率高于同时间点的其他三组(P均<0.05);2.mNSS结果显示,转染组在实验干预后1,3,5,7d得分显著低于同时间点的BMSCs组与NaCl组(P均<0.05);3.脑组织含水量测定结果显示,转染组在1,3,5,7d脑组织含水量低于同时间点的BMSCs组与NaCl组(P均<0.05);4.Western blot结果显示,与BMSCs组与NaCl组比较,转染组脑组织内ApoJ表达水平均高于同时间点的两组(P均<0.05)。结论:携带ApoJ基因的骨髓间充质干细胞能够在ICH大鼠脑组织内表达载脂蛋白J,外源性ApoJ对脑出血具有治疗作用,可以促进脑出血大鼠的神经功能的恢复,减轻脑水肿,改善脑出血大鼠预后。
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