黄瓜是世界重要蔬菜之一,具有极高的经济价值,但是由于长期连作,黄瓜产生严重的连作障碍问题。特别是黄瓜枯萎病,已严重威胁到黄瓜生产。然而,对黄瓜枯萎病的防治目前尚无理想的化学药剂和抗病品种,一些栽培管理措施也只能起到局部的控制作用,因此加强该病的防治迫在眉睫,生物防治作为综合防治黄瓜枯萎病的措施之一,对生态平衡和可持续农业的发展具有特别重要的意义。基于本实验室已经筛选出的2株高效拮抗菌株,哈茨木霉T37和枯草芽孢杆菌SQR9,将其接种于合适的有机肥(organic fertilizer, OF)载体中进行二次固体发酵,获得新型微生物有机肥(bio-organic fertilizer, BIO)。本试验研究结果如下：(1)盆栽试验研究了以这两株拮抗菌制成的三种BIO对黄瓜生长以及对枯萎病防治的影响。结果表明：施用BIO处理均不同程度地降低了黄瓜枯萎病的发病率,施用BIOⅢ后发病率降至13.73%,而对照发病率为100%。BIOⅠ、BIOⅡ和BIOⅢ处理均能显著提高黄瓜生物量,分别是对照的2.55、2.46和2.58倍。荧光定量PCR(real-time PCR)测定黄瓜根际尖孢镰刀菌数量的结果表明,施用BIOⅡ和BIOⅢ能够将病原菌数量控制在103 copies g-1土,而对照土壤高达107 copies g-1土。定殖实验结果也显示菌株SQR9和T37均能在黄瓜根系表面很好定殖,抢占生态位点,保证其拮抗功能的实现。(2)通过促生盆栽试验,研究了SQR9对植株生长情况的影响。试验结果表明：加入SQR9菌液能够有效地促进黄瓜生长；处理1、2、3的地上部株高分别为CK的1.46、2.21和2.30倍,根系长度分别比CK增加了26%、54%、77%。(3)菌株SQR9发酵液经过酸沉淀、甲醇浸提等步骤得到脂肽化合物的粗提物,通过平板对峙实验发现粗提物对病原菌菌落生长的抑制率为68.2%；用高效液相色谱(HPLC)从粗提物中分离出五种脂肽类物质,发现这五种物质都有拮抗活性；利用液质联用仪测定菌株SQR9部分抗菌物质的分子量,推测SQR9的抗菌物质中含有Fengycin和Bacillomycin D这两种脂肽类物质；通过PCR检测发现SQR9基因组中含有Fengycin和Bacillomycin D这两种物质的部分基因片段。用高效液相色谱从SQR9发酵液中分离到植物激素IAA和赤霉素,其中IAA的产量为52.03 mg/L；通过分隔平板培养法,发现SQR9能产生挥发性物质,促进拟南芥生长。综上所述,施用BIO在降低黄瓜枯萎病发病率、控制尖孢镰刀菌的数量和促进黄瓜生长等方面都具有显著效果。SQR9和T37均能在黄瓜根表很好定殖并形成生物膜,保证其拮抗功能的实现。