2A肽的核糖体跳跃技术是一种新型技术。2A肽长度为18～22个氨基酸的“顺式作用水解酶元件”，具有结构短小、蛋白分割效率高的特点，因而被越来越多应用于多顺反子表达载体的构建中。该项技术目前主要集中于酵母（Saccharomyces cerevisiae）和哺乳动物细胞研究中，在植物中的应用研究还比较少。本试验利用猪捷申病毒2A（Porcine teschovirus-12A，P2A）和东亚细亚病毒2A（Thosea asigna virus2A，T2A）首次将基于雌激素受体的反式激活因子XVE(X，the DNA-binding domain of the bacterial repressor LexA;V,the acidic transactivating domain ofVP16;E,the regulatory region of the human estrogen receptor)、绿色荧光蛋白GFP(green fluorescent protein，GFP)和抗除草剂基因Bar(bialaphos resistance，Bar)三个基因串联后受35S启动子调控，构建成多顺反子共表达载体pX6-2A，转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)研究2A肽在植物中的切割效果。
　　杂交育种可以把多个品种的优良性状集中在一起，是实现作物杂种优势的重要途径。但在育种实践中发现，不少农作物的天然雄性不育资源严重匮乏。在杂交育种研究中雄性不育株的创造是十分关键的。本研究在2A肽核糖体跳跃技术的基础上，拟通过人工合成的不育基因AB和iA分别构建雄性不育载体pAB和piA，以Columbia型拟南芥和大豆[Glycine max(L.)Merrill]品种“Mustang”为材料，对不育基因AB和iA及不育载体pAB和piA的功能进行研究，验证其在植物中的不育性。主要研究结果如下:
　　1.利用P2A和T2A首次将XVE，GFP和Bar3个基因串联后受35S启动子调控，构建了多顺反子共表达载体pX6-2A。
　　2.获得转pX6-2A基因的拟南芥植株，结果表明P2A和T2A均能够高效“分割”XVE，GFP和Bar3个目的蛋白，成功完成“核糖体跳跃”，且在分割过程中不会互相干扰，适用于在植物材料中的应用研究。
　　3.利用人工合成的不育基因AB和iA构建了雄性不育载体pAB和piA。
　　4.获得转pAB基因的拟南芥植株。T1代转pAB基因的拟南芥植株部分角果不能结实或结实率低，主要表现为不育株的角果内种子排列稀疏，间隙较大。T1代单株收获种子(T2代)的分离比为1∶1.16，符合孟德尔分离定律;T2代转pAB基因的拟南芥植株的花朵表现为没有花瓣或花瓣短小不能正常伸出展开，花药皱缩至柱头的1/3处左右，部分花药无活性，平均不育率为55％。
　　5.获得转piA基因的拟南芥植株。T1代转piA基因的拟南芥植株花瓣缺失，花粉没有活性，不能正常结实，表现为完全不育。
　　6.利用原位遗传转化法转化大豆品种“Mustang”，经Basta筛选、荧光观察，初步获得4株转pAB基因的大豆植株。