【摘 要】
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目的:观察透射电镜下脊髓突触体形态,定性定量检测突触体不同处理条件下的氨基酸递质,研究Percoll密度梯度离心法所得大鼠脊髓突触体的形态是否完整及其生理活性。方法:将制
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目的:观察透射电镜下脊髓突触体形态,定性定量检测突触体不同处理条件下的氨基酸递质,研究Percoll密度梯度离心法所得大鼠脊髓突触体的形态是否完整及其生理活性。方法:将制得的大鼠脊髓突触体混匀后分为三组,正常温育组、氯化钾刺激组、超声细胞破碎仪破碎组;使用透射电镜观察三组不同处理下脊髓突触体的形态学改变;使用高效液相色谱仪检测在正常温育组、氯化钾刺激组和超声细胞破碎仪组脊髓突触体悬液上清液中氨基酸的类别和含量。结果:各组电镜鼠脊髓突触体图像如文中注图所示,我们得到了形态完整的大鼠脊髓突触体;大鼠脊髓突触体中含有的氨基酸递质有天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、r-氨基丁酸,虽然在脊髓匀浆离心上清液中检测到牛磺酸存在,但是突触体中并未检测到牛磺酸;在氯化钾刺激释放和正常温育条件下对比中,得出天门冬氨酸、谷氨酸释放量明显增加(P<0.01),有统计学意义,甘氨酸、r-氨基丁酸呈现出增加趋势,但统计学无显著性;另外,在大鼠脊髓突触体中我们检测到有天门冬酰胺的存在,且两组之间有统计学意义;我们使用超声波细胞破碎仪破碎突触体,在同一蛋白浓度下检测氨基酸递质明显低于其他两组,这一现象仍需进一步研究。结论:大鼠脊髓突触体中含有的氨基酸递质有天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、r-氨基丁酸;Percoll密度梯度离心法所得大鼠脊髓突触体具有生理活性。
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