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近年来,随着口腔医学的发展,越来越多的新型牙科材料如脱敏剂、充填材料等出现并应用于临床。这些材料在临床应用前,要考虑对牙髓的刺激性,这与材料相接触的牙本质的通透性和材料本身的生物相容性有关。牙本质的通透性过大时,就出现了牙本质敏感症。影响牙本质通透性的因素众多,体内测定困难。因此本研究模拟体内情况,采用体外灌注法测定牙本质的通透性并探讨其应用,设计并实施了以下实验:目的:体外比较不同测试条件及不同部位人牙本质的通透性,并通过牙本质通透性的变化来评价脱敏材料的疗效,同时将牙本质的通透性运用到体外细胞毒性测定实验中,研究牙本质通透性对牙科材料细胞毒性的影响,为今后更好的选择牙科修复材料提供实验参考。方法:1.牙本质通透性的体外测定用低速锯切取人离体下颌第三磨牙牙合侧近髓、中间及颊侧近髓、中间牙本质片,表面经过碳化硅水砂纸打磨,超声清洗后测定各牙片基线通透值。经酸蚀处理后,采用灌注法分别在不同液压,不同渗透液体条件下测定其通透值;并用金相显微镜观察各部位牙本质小管密度,分析通透值与牙本质小管密度间的相关性。2.脱敏材料对牙本质通透性的影响用低速锯切取人离体下颌第三磨牙牙合侧近髓牙本质片60个,表面经过碳化硅水砂纸打磨,超声清洗,吹干表面水分。牙本质片远髓面用350g/L磷酸处理30s,处理后所有试样随机分为三组,用体外灌注法测定三组牙本质片基线通透值。三种脱敏材料:极固宁、Gluma和舒适达修复牙膏,分别测定脱敏材料使用后的通透值,并用SEM观察牙本质表面形貌。3.牙本质通透性在牙科充填材料体外细胞毒性测定中的应用选取前期试验中通透值相近的颊侧近髓牙本质片,96孔滤膜渗透板片切为每条含有8个孔(嵌入井)的滤膜渗透装置,去除滤膜后以颊侧近髓牙本质片代替,用医用生物胶将牙本质片紧密粘固在嵌入井底,将含有牙本质片的嵌入井置入96孔板内,制备以牙本质为屏障的体外细胞培养装置。常用的5种牙科充填材料按要求制备为10mm×10mm×1mm的试样块,将试样浸入含100ml/L FBS的RPMI1640培养液内(液量与试样表面积之比为10ml/cm2),37静置24h后,取每种材料浸提液稀释为50%浓度。采用浸提液法和牙本质屏障法对5种牙科材料进行细胞毒性测定,并通过细胞形态观察及细胞活性检测评价实验结果。结果:1.牙本质表面经酸蚀处理后,其通透值均显著大于未酸蚀的对照组(P<0.05),其中酸蚀30s的通透值增加最显著,与酸蚀60s的牙本质相比差异亦有统计学意义(P<0.05)。100cm液压测定的通透值明显大于32cm液压(P<0.05);稀释牛血清测得的通透值明显小于蒸馏水和生理盐水(P<0.05),蒸馏水与生理盐水相比无统计学差异(P>0.05);牙合侧牙本质通透值明显大于颊侧,近髓牙本质通透值明显大于中间(P<0.05);牙本质通透值与其小管密度呈显著正性相关(P<0.05)。2.三种脱敏材料使用后牙本质通透值均显著低于使用前(P<0.05),通透值由低到高依次为:极固宁≈Gluma<舒适达专业修复牙膏(P<0.05)。SEM观察到,三种脱敏材料均可不同程度的堵塞牙本质小管,降低牙本质的通透值。3.浸提液法结果为:高浓度氧化锌丁香油水门汀浸提液组,细胞密度减少、形态异常,几乎全部萎缩呈圆形;低浓度氧化锌丁香油水门汀浸提液组,可见少许细胞呈梭形,但细胞伸展较差。牙本质屏障法中氧化锌丁香油水门汀组,大部分细胞呈不规则三角形或梭形,有少许细胞形态异常。相同浓度浸提液组,各组材料细胞毒性由底到高顺序均为:氢氧化钙水门汀≈玻璃离子水门汀<复合树脂<磷酸锌水门汀<氧化锌丁香油水门汀(P<0.05)。牙本质屏障法中,各组材料细胞毒性由底到高顺序为:氢氧化钙水门汀≈玻璃离子水门汀<氧化锌丁香油水门汀<复合树脂<磷酸锌水门汀(P<0.05)。牙本质屏障法得到5种材料的细胞增殖率均高于浸提液法,其中氧化锌丁香油水门汀组尤为显著,为(89.1±3.6)%,等级评分显示用浸提液法测得氧化锌丁香油水门汀组细胞毒性呈重度,而用牙本质屏障法测得细胞毒性呈轻度。结论:1.牙本质表面用350g/L磷酸酸蚀30s,可以去除玷污层,且不会明显扩大牙本质小管。不同部位牙本质的通透性不同,牙合侧牙本质通透性大于颊侧,近髓牙本质通透性大于中间,且牙本质的通透性与其小管密度密切相关。测试液体影响牙本质的通透性。2.三种脱敏材料均可不同程度的堵塞牙本质小管,有效降低牙本质的通透值,其中以极固宁和Gluma降低通透值效果最好。SEM观察材料堵塞牙本质小管的方法存在偏差,通透性的测定可以更加量化,操作简单,结果更准确。体外定量测定牙本质通透性的方法可以作为评价脱敏效果的手段之一。3.由于牙本质具有通透性,材料中未完全聚合、固化的化学成分通过牙本质小管扩散,引起细胞毒性。牙本质小管液能够稀释扩散进入牙本质小管的化学成分。牙本质片具有可控的通透性,以此为屏障的细胞培养装置制作简便,易于推广。牙本质屏障法更能模拟材料与牙髓组织的在体情况,用该方法测得的实验结果提高了与临床的相关性。