纳米微晶纤维素提升黄酮类水不溶性药物抗氧化性能的研究

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纤维素是目前从自然界中可获得的最丰富的可再生聚合物资源,被广泛应用于造纸、食品、制药、纺织和建筑材料等多种领域。纳米微晶纤维素(CNC)是从木材,稻草,棉花等纤维中提取的生物材料,具有高机械强度、高弹性模量、高纵横比、大的比表面积等特性。另外,由于其生物可降解性、生物相容性、无毒性和表面丰富的羟基和负电荷等特点,CNC在许多领域表现出巨大的潜力。黄酮类化合物是一种天然多酚类化合物,具有抗氧化、抗血管生成、抗炎抑菌、调节雌激素和延缓细胞凋亡等药理性和生物学活性。然而其中许多黄酮类化合物水溶性较差,生物利用度较低,严重制约了其在生物医药领域的应用。本论文以CNC为载体,采用反溶剂重结晶法将柚皮素、金雀异黄酮和山奈酚三种黄酮类水不溶性药物负载至CNC上形成纳米复合物,并对纳米复合物制备工艺条件进行研究。借助透射电子显微镜(TEM)、傅立叶红外变换光谱(FTIR)和X射线粉末衍射仪(XRD)分别研究纳米复合物的表面形貌、化学状态和结晶状况。最后通过体外溶出实验和体外清除羟基自由基或DPPH自由基效果来评价CNC提升黄酮类水不溶药物的溶出性能和抗氧化性能。本论文研究表明:(1)CNC/柚皮素纳米复合物制备工艺条件为溶剂与反溶剂体积比1:20,pH值7.5,柚皮素浓度40 μg.mL-1,结晶温度0℃。TEM结果表明,CNC可以显著地降低柚皮素颗粒粒径,并赋予柚皮素良好的分散性。XRD和FTIR结果表明CNC/柚皮素纳米复合物中柚皮素颗粒为无定形态存在,且和CNC之间以静电和氢键作用力相结合。体外溶出度结果表明,溶出时间120 min时,CNC/柚皮素纳米复合物中柚皮素的溶出度高达92.1%,与柚皮素原料(22.5%)和水/柚皮素(30.2%)相比,溶出度有显著的提升效果。柚皮素浓度为50μg.mL-1时,CNC/柚皮素纳米复合物对羟基自由基清除效率为43.3%,与水/柚皮素(11.2%)相比有明显提升。(2)CTAB改性CNC的工艺条件为CTAB与CNC质量比为1:100,pH值7.5,反应时间30min,反应温度为50℃。CNC/CTAB/金雀异黄酮纳米复合物表征结果表明,CTAB对CNC改性之后疏水性和与金雀异黄酮的相容性增加,金雀异黄酮被均匀地负载至CNC上。溶出时间为120 min时,与金雀异黄酮原料(0.85%)和水/金雀异黄酮(14.2%)相比,金雀异黄酮在CNC/CTAB/金雀异黄酮纳米复合物中的溶出度高达92.5%。体外清除羟基自由基实验表明,金雀异黄酮浓度为50μg·mL-1时,CNC/金雀异黄酮和CNC/CTAB/金雀异黄酮纳米复合物的清除效果分别为46.4%和68.5%,明显高于金雀异黄酮原料(1.25%)。(3)与山奈酚原料(1.2%)相比,CNC/CTAB/山奈酚纳米复合物中山奈酚的溶出度在120 min时可达88.5%。DPPH自由基清除实验表明,在50μg·mL-1浓度下,CNC/CTAB/山奈酚纳米复合物的DPPH清除率达到91.6%,与水/山奈酚(15.3%)和山奈酚原料(6.6%)相比,有显著改善。
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