活血祛湿方对肝内胆汁淤积型大鼠的治疗作用研究

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目的:探讨活血祛湿方对于α-荼基异硫氰酸盐(ANIT)诱导的肝内胆汁淤积型大鼠的疗效。材料与方法:采用ANIT诱导制备肝内胆汁淤积大鼠模型40只,随机分为模型组、西药组及中药组,除模型组20只外,其余每组各10只,并选未造模大鼠10只作为正常对照组。各组均日一次灌胃给药,模型组和正常对照组按6ml/kg予以0.9%氯化钠注射液,西药组按0.1g/kg/d给予思美泰,中药组按2ml/d给予活血祛湿方。给药时间从造模当天开始,48h后处死模型组10只大鼠,留取血清备用。用药7天后处死全部动物。全自动生化分析仪检测各组大鼠肝功能指标(TBIL、DBIL、TBA、ALT、AST、ALP),酶联免疫试剂盒测定脂蛋白X(LP-X),聚合酶链式反应测定Na~~+-H~~+交换体mRNA的表达,光镜下观察肝组织病理学改变,透射电镜观察肝细胞超微结构。结果:⑴肝内胆汁淤积时,SD大鼠血清总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)和胆汁酸(TBA)水平均显著升高(P<0.05)。与造模后48h相比,实验完成时模型组血清TBIL、DBIL、TBA水平均有明显下降(P<0.05)。实验完成时,西药组和中药组大鼠血清TBIL、DBIL、谷丙转氨酶(ALT)水平与模型组相比明显降低(P<0.05),但两组间疗效无明显差别(P>0.05)。西药组大鼠血清TBA、碱性磷酸酶(ALP)水平与模型组相比未见明显差异(P>0.05),中药组大鼠血清TBA、ALP水平与模型组相比差异明显(P<0.05)。各组血清中AST活性无明显差异(P>0.05)。⑵与模型组比较,西药组和中药组脂蛋白X(LP-X)含量显著降低(P<0.05),两组无明显差别(P>0.05)。⑶肝内胆汁淤积时, Na~~+-H~~+交换体mRNA的表达减少,西药组和中药组均可增加其表达,与模型组相比有极显著差异(P<0.01),但仍明显低于正常组(P<0.01)。⑷光镜下可见模型组肝小叶结构不完整、轮廓不清、有散在的点状坏死;胆管上皮细胞肿胀、坏死、管腔宽大;汇管区有大量炎症细胞浸润。西药组肝小叶结构比较完整,仅个别肝细胞呈空泡样变性。中药组肝小叶结构比较完整,小叶间胆管大致正常,汇管区有少量炎症细胞浸润,肝细胞变性、坏死程度较轻。⑸电镜下可见模型组细胞质内线粒体肿胀,部分线粒体嵴断裂,呈空泡样变;滑面内质网变化不明显,糖原较多,高尔基体肥大;细胞核边聚,且核较大,核内异染色质增多;肝血窦处可见Kupffer细胞,呈不规则形,胞质内有大量的溶酶体和线粒体;肝细胞内部分细胞器溶解;毛细胆管有不同程度的扩张,且毛细胆管内微绒毛减少,胆管周围的致密带或外质层增宽。西药组细胞质溶解,细胞核固缩,线粒体收缩,滑面内质网扩张,粗面内质网增多。中药组肝细胞结构基本正常,细胞器较丰富,有大量的糖原颗粒。结论:活血祛湿方能改善肝内胆汁淤积时异常的血清生化指标,提高LP-X的水平,使Na+-H+交换体mRNA的表达增加,减轻肝细胞变性、坏死和毛细胆管扩张,对于ANIT所致的大鼠肝内胆汁淤积有显著的治疗作用。
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