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热应激是影响我国家禽生产性能、繁殖性能和产品品质的重要因素,容易爆发各种疾病。高温应激导致畜禽体内肠道功能受损,肠道微生物平衡遭到破坏,导致机体肠道免疫能力下降。热应激对畜禽肠道免疫功能尤其是肠道天然免疫应答的影响和机制则鲜为报道。益生菌作为一类对宿主有利活性的微生物,如今被大家广泛接受并替代抗生素在饲粮中添加,益生菌可以改善肠道功能,有利于肠道吸收和消化营养物质,促进畜禽生长和发育。因此,开展热应激条件下畜禽肠道天然免疫功能的变化以及了解其调控机制,对丰富热应激理论,有效改善热应激带来的损伤具有重要的理论和实践指导意义。本试验旨在探讨益生菌对热应激肉鸡生长性能、免疫器官指数、抗氧化指标、肠道微生物结构和天然免疫相关基因表达的影响。选用300只1日龄的健康AA肉鸡常规饲喂至21日龄,选取健康体重相接近的肉鸡240只,随机分为四组,每组设4个重复,每个重复有15只鸡。四组处理如下:适温对照组,饲喂基础日粮;适温+益生菌组,饲喂基础日粮+益生菌;热应激组,饲喂基础日粮;热应激+益生菌组,饲喂基础日粮+益生菌。适温组温度保持在22-24℃左右,热应激组温度维持在28℃-35℃-28℃一个日循环的变化中,试验所饲喂的益生菌为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)和屎肠球菌(Enterococcus faecium)混合物,添加于基础日粮中使其活菌数达到10~9cfu/kg以上。本试验采用2×2双因素设计。分别于肉鸡28日龄、35日龄和42日龄采样。翅静脉采血,用来测定血清抗氧化指标;处死并剖开腹腔,分离胸腺、脾脏和法氏囊;剪取十二指肠、空肠和回肠中段4 cm处用以测定肠道的形态结构;无菌条件下收集回肠内容物和黏膜,测定微生物的多样性;采集空肠组织用于检测相关基因的表达。试验结果如下:1热应激显著降低肉鸡三个阶段(第21-28日龄、第28-35日龄和第35-42日龄)的采食量(P<0.05),在21-28日龄时,热应激显著升高料重比,添加益生菌显著提高日增重,显著降低料重比(P<0.05);在35-42日龄时,与适温对照组相比,热应激显著降低平均日增重(P<0.05)。热应激显著降低肉鸡免疫器官指数(P<0.05),益生菌对其作用不明显。2热应激显著降低肉鸡肠道三个阶段十二指肠绒毛高度(P<0.05),在28-35日龄时,热应激肉鸡十二指肠绒毛高度和隐窝深度的比值显著降低(P<0.05),添加益生菌可以显著提高肉鸡小肠第21-28日龄和第28-35日龄十二指肠和第35-42日龄回肠的绒毛高度(P<0.05)。热应激显著升高肉鸡谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和谷胱甘肽(GSH)含量(P<0.05)。3热应激影响肉鸡回肠中微生物含量,显著降低42日龄肉鸡肠道黏膜的优势菌门如厚壁菌门,显著升高42日龄肉鸡肠道内容物芽孢杆菌属(P<0.05)。饲粮中添加益生菌有降低链球菌属含量的趋势(P=0.053)。饲粮中添加益生菌对菌群的多样性和丰富度无显著影响。4热应激显著降低肉鸡35日龄空肠中TLR2基因的表达变化(P<0.05),提高35日龄肉鸡空肠中TLR15基因的表达(P<0.05);饲粮中添加益生菌可提高35日龄肉鸡空肠TLR2和28日龄空肠Cathelicidin-B1基因表达量(P<0.05)。综上所述,热应激降低肉鸡生长性能,而饲粮添加益生菌对肉鸡的生长有改善作用。热应激破坏肉鸡肠道结构,饲粮中添加益生菌可改善肠道结构。热应激破坏肉鸡机体内的抗氧化酶系统,饲粮添加益生菌可改善肉鸡抗氧化能力。热应激破坏肠道菌群结构,改变天然免疫相关基因的表达,饲料中添加益生菌可以改善天然免疫基因的表达。