玄参叶斑病的病原学、发生规律及防治技术研究

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玄参(Scrophularia ningpocnsis)是一种药用植物,具有较高的经济价值,近几年,湖北省建始县的玄参上叶斑病发生严重,直接影响了当地的经济效益以及药用开发。作者在病原鉴定和生物学特性研究的基础上,根据病害发生特点,探讨了该病的防治技术。研究结果如下:从湖北省建始县玄参种植基地的玄参病叶上分离得到Phoma sp.菌株。通过菌丝块和分生孢子悬浮液分别接种玄参叶片,证实分离所获得的Phoma sp.为致病菌。病菌在PDA培养基上培养,菌丝初无色,2 d后菌落颜色从白色变为浅黄色,7 d后菌落呈浅褐色,10 d后分生孢子器散生或聚生在菌落表面,球形或扁球形,直径137~157μm,高110~126μm;器壁褐色,由数层细胞组成,内壁形成产孢细胞,上着生分生孢子,产孢细胞瓶形,单胞,无色,5.7~7.8×3.8~4.5μm,分生孢子椭圆形,单胞,无色,4.1~6.1×2~2.7μm,内无油球。rDNA-ITS测序结果与GenBank中的序列进行同源性比较,结果表明供试菌株与Phoma herbarum的同源性高达97%。根据形态学特征和分子鉴定结果,将该病原菌鉴定为Phoma herbarum Westend。对病原菌生物学特性研究结果表明,在有无光照条件下病菌均可生长,连续光照有利于菌丝的生长和分生孢子的萌发。病菌在10~35℃的范围内均能生长,25℃为菌丝生长和分生孢子萌发的最适温度。菌丝在pH值为3.0~11.0的PDA培养基上均能生长,生长最适pH值为6.0;分生孢子在pH为3.0~11.0范围内均能萌发,其中以pH 7.0~8.0最为适宜。病菌能够利用多种碳源和氮源,但不同碳源和氮源对病菌菌丝生长和产孢量有显著影响。病菌以淀粉为碳源以及以谷氨酸、酵母膏、硝酸钾和硝酸钠为氮源时生长最好,以淀粉、蔗糖、半乳糖为碳源和以蛋白胨、硝酸钾、硝酸钙和尿素为氮源时产孢量最大。病菌菌丝和分生孢子的致死温度分别为55℃,10 min和60℃,10 min。通过离体叶片接种测定病原菌寄主范围,结果表明,病原菌可以侵染大葱、烟草、番茄、茄子、辣椒、大白菜、小白菜、包菜、玉米、棉花、花生、豇豆、苋菜、蕹菜、油麦菜、丝瓜、苎麻和芝麻。病原菌越冬研究表明,病原菌在温室(25℃)、冰箱(4℃)、室外土表0 cm、土表下20 cm、土表下10 cm处理5个月后均能存活,在温室内温暖干燥条件下病原菌分离率最高,达到58%,在室外土表条件下,分离率为38%;随土壤深度增加,分离率降低,在土表下20cm条件下,病原菌分离率为12%,而在冰箱中湿冷条件下,分离率仅为4%。2007年和2008年对玄参叶斑病发生规律的观察结果表明,5月中下旬为该病害的始发期,田间开始有零星病株出现,病株病斑较小,8月下旬到9月中下旬为该病害的高峰期,田间病株大量增加,病斑扩展迅速,病情增长快,病情指数在12.6~30.5之间,9月下旬至11月玄参收获,病害稍有加重,病情指数在31.7~39.3之间。在PDA平板上进行的抑菌试验结果表明,供试6种药剂以10%世高水分散粒剂、30%爱苗乳油抑菌效果最好,EC50分别为0.10μg/ml、0.29μg/ml,以80%代森锰锌可湿性粉剂效果较差,EC50为27.94μg/ml,50%百菌清可湿性粉剂抑菌效果最差,EC50为120.88μg/ml。2007年和2008年田间药效试验结果表明:10%世高水分散粒剂防病效果最好,防效分别为48.38%和73.62%,40%福星乳油防治效果最差,防效分别为28.83%和50.44%。对8个不同来源的玄参品种进行抗病性评价,2007年和2008年结果表明,四川1号,重庆1号抗病性最好,陕西1号最感病。
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