小鼠胚胎共培养:体细胞状态影响及作用机理

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在一些简单的培养基中,受精卵往往发生“发育阻断”。尽管近年来在几种动物(如小鼠和牛)用成份明确的培养基已经能够使胚胎克服体外阻断而发育到囊胚,但许多动物的胚胎在体外还必须依靠共培养才能发育到囊胚期。另外,胚胎与体细胞共培养对于了解体细胞与胚胎的相互作用也十分重要。因此,有必要深入研究共培养的影响因素和作用机理。本实验首先把昆明白小鼠原核胚分别与小鼠、山羊和鸡的输卵管上皮细胞(OEC)、大鼠肝细胞(BRL)和非洲绿猴肾细胞(VERO)共培养,确定异种体细胞、细胞贴满程度和传代次数对小鼠胚胎发育的影响;接着,分别用流式细胞计量仪和Annexin标记检测不同贴满程度和传代次数山羊OEC的细胞周期和凋亡程度,确定体细胞的生理状态与胚胎发育的关系;最后,通过使用不同的条件化培养液和加隔离膜共培养,以及用高效液相色谱分析条件培养液中的HX浓度的方法探讨了体细胞与共培养胚胎相互作用的机理。
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