兔眼晶状体再生的实验研究

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第一部分 兔虹膜色素上皮细胞转分化的实验研究目的:在体外成功分离培养虹膜色素上皮细胞,并观察其在特定条件下转分化为晶体上皮细胞的现象;方法:采用酶辅助机械分离法分离并培养兔眼虹膜色素上皮细胞。传代过程中在DMEM培养基内加入苯硫脲、透明质酸酶、重组人成纤维细胞生长因子-4及 L-抗坏血酸-2-磷酸完成转分化过程。分别对培养起始和终末的细胞进行光镜(包括HE染色)、电镜观察和免疫细胞化学染色鉴定。结果:成功分离并培养出原代的虹膜色素上皮细胞,经过特定条件的培养最终转分化为晶体上皮细胞,免疫细胞化学鉴定虹膜色素上皮细胞和晶体上皮细胞均有其各自特异染色。结论:酶辅助机械分离法是进行虹膜色素上皮细胞原代培养较好的方法。在体外培养条件下,虹膜色素上皮细胞可转<WP=7>分化为晶体上皮细胞,而透明质酸酶、苯硫脲、L-抗坏血酸-2-磷酸、重组人成纤维细胞生长因子-4等因素可能参与了对上述转分化过程的调节。关键词:兔,虹膜色素上皮细胞,晶体上皮细胞,转分化第二部分 兔眼晶体再生的体内实验目的:观察活体内兔眼晶体再生现象及维生素A对上述晶体再生过程的影响。方法:兔眼行囊内晶体摘除术,术后实验组隔日腹部皮下注射维生素A 0.1ml,对照组隔日腹部皮下注射注射用水0.1ml,注射共持续2月。术后定期观察,16周后处死动物,观察晶体再生情况并做组织切片和超薄切片观察。结果:实验组与对照组中分别有3眼和1眼可见虹膜后再生的晶状体样物质,行光镜和电镜检查为典型晶体结构。结论:兔眼晶体摘除后可再生出具有典型晶体结构的物质,但目前尚未观察到完整的再生晶体。维生素A对上述过程有一定的正向调节作用。
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