多糖和糖蛋白作为常见的天然产物已经应用于人类生活的各个方面,并且由于其特有的生物活性成为研究的热点。常见的多糖和糖蛋白的分离纯化方法操作过程复杂、产物纯度不高,分离纯化过程往往会破坏产物的结构及活性。基于此,本研究设计合成苯硼酸功能化温敏性嵌段聚合物,开发适用于多糖（黄芪多糖）和糖蛋白（辣根过氧化物酶）的分离纯化新方法,具体如下:（1）通过可逆加成断裂链转移（RAFT）聚合反应合成了一种新的苯硼酸功能化温敏性嵌段聚合物PEG₁₁₃-b-PVBA₄₉-b-PNIPAM₁₀₅,通过红外光谱（FT-IR）、紫外谱图（UV-vis）、核磁氢谱（¹H NMR）和凝胶渗透色谱（GPC）表征了温敏嵌段聚合物PEG₁₁₃-b-PNIPAM₁₀₅和PEG₁₁₃-b-PVBA₄₉-b-PNIPAM₁₀₅的结构、聚合度和分子量;在不同温度下测定聚合物溶液的紫外可见光透过率,研究温敏嵌段聚合物浊点的变化,通过对比PEG₁₁₃-b-PNIPAM₁₀₅和PEG₁₁₃-b-PVBA₄₉-b-PNIPAM₁₀₅的LCST,验证苯硼酸功能化温敏性嵌段聚合物成功合成。并通过控制温度,直观的观察到溶液的澄清-浑浊现象;不同分子量的葡聚糖对PEG₁₁₃-b-PVBA₄₉-b-PNIPAM₁₀₅溶液的浊点会产生不同的影响,三种葡聚糖降低温敏嵌段聚合物的LCST的分子量顺序为100000<40000<6000。（2）基于不同分子量多糖对于苯硼酸功能化温敏性嵌段聚合物PEG₁₁₃-b-PVBA₄₉-b-PNIPAM₁₀₅浊点温度的影响,开发了一种新型控温分级沉淀黄芪多糖的方法。由于不同分子量黄芪多糖对聚合物浊点的影响程度不同,对PEG₁₁₃-b-PVBA₄₉-b-PNIPAM₁₀₅控温沉淀黄芪多糖的条件进行了探索,实验结果显示PEG₁₁₃-b-PVBA₄₉-b-PNIPAM₁₀₅与黄芪多糖的最佳结合pH为8,最佳解离pH为4,结合和解离的最优时间均为30 min。在不同温度下沉淀出不同级分的黄芪多糖（APS1、APS2、APS3和APS4）,对四种级分的黄芪多糖进行了一系列的结构测试,包括FT-IR、SEM、GPC、GC和刚果红实验,并对其抗氧化性和抗肿瘤活性进行了研究。刚果红实验可以判断APS1和APS3含有三螺旋结构,APS2和APS4没有三螺旋结构或者三螺旋结构具有特异性,并通过气相色谱分析了黄芪多糖的单糖组成及相对含量,生物活性实验则可以看出,多糖的分子量在一定程度上会影响多糖级分的生物活性。（3）构建双水相萃取-亲和控温沉淀两步法分离纯化糖蛋白,即双水相萃取初级分离纯化,结合苯硼酸功能化温敏性嵌段聚合物控温沉淀进一步纯化辣根过氧化物酶（HRP）.研究了一系列PEG-盐双水相体系（ATPS）的液-液相平衡,双节线数据拟合度最高的经验方程是w₁（28）exp(a（10）bw₂^0.5（10）cw₂（10）dw₂²)。将该方程与“杠杆原理”偶联,通过MATLAB软件快速计算出PEG-盐ATPS在室温下的液-液相平衡数据,并绘制出完整的双水相体系相图。用9种目标物筛选出最佳双水相体系,即PEG4000-（NH₄）₂SO₄ ATPS,其中PEG4000的质量分数为0.2,（NH₄）₂SO₄的质量分数为0.18。利用此双水相体系成功实现HRP的初步纯化,随后在多种蛋白质混合体系中加入苯硼酸功能化温敏嵌段聚合物PEG₁₁₃-b-PVBA₄₉-b-PNIPAM₁₀₅,进一步纯化HRP。将上述构建的双水相萃取-亲和控温沉淀两步法应用于实际辣根粗酶液中HRP的选择性分离纯化以论证方法的有效性。