重组青霉素酶TEM-1的克隆表达、纯化及酶学性质研究

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青霉素酶TEM-1是β-内酰胺酶的一种,由于其具有水解青霉素类抗生素的β-内酰胺环的特点而得到广泛应用。国内该类酶的产酶菌株存在着产酶能力较低、培养基价格昂贵和生产过程中酶活性不稳定等缺点。本论文利用分子生物学方法构建青霉素酶大肠杆菌表达菌株,通过20L生产青霉素酶,经过纯化得到高活性高纯度的酶蛋白,并对其酶学性质进行了研究。目的:建立高效表达及纯化青霉素酶TEM-1的方法;并对其酶学性质和功效进行研究。方法:将构建质粒pET22b-penp转化质粒到大肠杆菌BL21中,经鉴定筛选后,用IPTG诱导
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