新生儿窒息是围产期医学的重要课题。窒息产生的低氧血症和酸中毒常导致多脏器损害,其中缺氧缺血性脑病(Hypoxic-Ischemic Brain Damage,HIBD)是窒息后脑损伤死亡和伤残的最常见原因。随着新生儿重症监护的广泛开展,窒息的抢救成功率在逐年提高,缺氧缺血性脑病患儿亦随之相应增加,25%的存活儿可呈现永久性脑损害如脑瘫、癫痫、智力低下、学习困难及视听障碍等临床后遗症。发展中国家HIBD发病率为3—12%,伤残率及死亡率可高达30%。据报道在孟加拉国死产胎儿中有15—20%是由HIBD所致;在我国则有7%—10%(140—200万)的新生儿发病,其中约1/3的窒息儿死亡,30万左右的窒息儿出现不同程度的残疾。对此疾病目前临床尚无统一、有力、完整的治疗方案,特别是缺乏针对远期有肯定疗效的有效措施。 研究表明,针刺可改善各种原因所造成的认知障碍,包括老年性痴呆、血管性痴呆及糖尿病性痴呆等等。有报道称,早期给予穴位注射可促进患儿智力发育,降低脑瘫的发生。电针围产期缺血缺氧性脑损伤大鼠的“百会”穴,可通过影响海马fos蛋白的表达,从而提高新生鼠远期空间学习记忆能力。目前,以针刺为主的综合疗法是临床治疗小儿脑性疾病的最为常用的方法,但至今为止,所得结果多为临床证据,又总因选择其病理过程的时期不同或病变已不可逆转,或功能不足代偿等,使之存在疗程长而疗效不稳定、相当部分病例疗效差等问题。本研究拟模拟围产期窒息建立HIBD模型,并观察早期针刺干预对其学习记忆能力的影响及其作用机制,着重研究针刺对海马突触可塑性的影响、对海马兴奋性和抑制性神经递质释放的影响,以及对海马兴奋性和抑制性神经细胞功能的影响及相互关系,为进一步研究其分子机制打下基础,为阐述针刺治疗HIBD的机理提供新的科学资料,为推广早期针刺改善新生儿学习记忆能力、提高针灸临床疗效提供实验依据。 本实验分为两部分,首先模拟围产期窒息建立HIBD模型,利用Morris水迷宫和海马脑片长时程增强效应(LTP)的记录从整体和细胞水平来评价模型的学习记忆能力和针刺的治疗作用;随后利用免疫组织化学方法观察针刺对HIBD学习记忆障碍动物海马Glu和GABA表达的影响,利用脑片膜片钳全细胞记录观察HIBD是否导致海马兴奋性神经元和抑制性神经元的功能受损以及针刺是否可以对抗此效应,以探讨HIBD学习记忆障碍的可能机理和针刺改善HIBD学习记忆障碍的可能机制。