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肝细胞生长因子(HGF)是一个多效应因子,在神经系统中具有重要作用,但是对于HGF在早期神经系统发育(特别是哺乳动物)中的具体作用还不明确,这方面的研究还很少。早前的研究发现采用HGF和G5 supplement结合EB法可诱导猕猴胚胎干细胞(rESCs)定向分化成高纯度(88.3±8.1%)的可移植的神经前体细胞,但是HGF在整个分化过程中的具体作用及HGF与其它因子的关系还不清楚。
本研究改进先前研究体系,用单层培养诱导体系代替EB法诱导体系,用bFGF代替G5 supplement。即采用单层培养的方式,分别用同时含bFGF和HGF、只含HGF或bFGF以及两者都没有添加的成分确定的分化液诱导rESCs向神经细胞分化。并检测HGF对rESCs来源的神经前体细胞的增殖速度的影响,旨在进一步研究HGF在整个分化过程中的具体作用及HGF与bFGF的关系。主要结论如下:1)采用单层培养法,同时添加HGF和bFGF可诱导rESCs在两周内定向分化为高纯度(>85%)的神经前体细胞,从而建立了一种更为简单的诱导rESCs分化成神经细胞的方法;2)不同分化条件下都得到了相似比例的神经前体细胞,表明外源性的HGF在诱导rESC向神经前体细胞转变的过程中对于神经细胞命运的决定并不起作用;3)HGF能有效地促进rESCs来源的神经前体细胞的增殖,并且与bFGF具有协同作用。