枣树是起源于我国的经济树种，枣果实具有丰富的营养价值和商品价值，现在越来越多的果农开始种植枣树，种植面积增大的同时枣果实病害的危害程度和范围也在不断增加，严重时甚至可造成绝产绝收，严重威胁到枣农的利益和我国的经济发展。因此探索枣果实内生真菌和筛选抑制枣缩果病病原的生防菌株就很有必要。本文对我国枣主产区之一的新郑灰枣枣果内生真菌多样性进行了研究，通过组织分离方法，对健康灰枣枣果内生真菌进行了分离、鉴定和保存，为以后枣内生真菌资源功能菌株的筛选和利用提供了依据。同时本文还以能引起枣缩果病的病原七叶壳梭孢Fusicoccum aesculi为靶病原，从枣、马齿苋、花椒等植物上分离得到内生细菌和杏、苹果、香蕉等果实表面腐生细菌以及实验室保存的木霉属真菌作为生防菌菌源，用以筛选对七叶壳梭孢有抑菌活性的生防菌株，旨在为枣缩果病生物防治和生态保护奠定基础。1.新郑灰枣枣果内生真菌的分离、鉴定2012年9月于河南省新郑市枣园采集健康的白熟期灰枣枣果，用自来水冲去表面污垢后，在无菌条件下对其进行组织分离，共分离到菌株78株，对其进行形态鉴定和分子鉴定，确定为9属16种，包括链格孢属Alternaria真菌3种，镰刀菌属Fusarium真菌4种，间座壳菌属Diaporthe真菌3种，茎点霉属Phoma真菌、叶点霉属Phyllostica真菌、假尾孢属Pseudocercospora真菌、尾孢属Cercospora真菌、炭疽菌属Colletotrichum真菌、平脐蠕孢属Bipolaris真菌各1种。其中优势菌群为链格孢属Alternaria真菌和茎点霉属Phoma真菌，分别分离到37株和21株，占总分离菌的47.43%和26.92%。2.SSCP技术用于分析枣果内生真菌多样性本实验针对采集的健康灰枣果实提取基因组DNA，然后用真菌通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增，将PCR扩增产物用于SSCP技术，以分析枣果内生真菌多样性，结果显示出仅仅有3条相对较为清晰的条带，没有反映出内生真菌的多样性。3.枣果内生真菌的潜在致病性分析在本实验中分离得到的6个种的真菌：链格孢Alternaria.Alternata、细极链格孢A.tenussinum、尖孢镰刀菌Fusarium.oxysporum、层出镰刀菌F.proliferatum、胶孢炭疽菌Colletotrichum.gleosporioides和头状茎点霉Phoma.glomerata，均被报道过能引起枣果实病害，可以认为是潜在致病菌。4.枣缩果病生防菌的筛选本文以能引起枣缩果病的病原七叶壳梭孢为靶病原，以从枣、马齿苋、花椒等植物上分离得到内生细菌和杏、苹果、香蕉等果实表面腐生细菌以及实验室保存的木霉属真菌作为生防菌菌源，来筛选对七叶壳梭孢Fusicoccum aesculi有抑制活性的生防菌株，通过平板对峙培养和离体实验，有4株菌株生防效果良好，先经过形态学特征初步观察，然后是生理生化特征分析、接着是16S rDNA序列分析以及16S rDNA-23S rDNA转录间隔区ITS序列的同源性分析，将其鉴定为同一个种解淀粉芽孢杆菌Bacillus.amyloliquefaciens，并用解淀粉芽孢杆菌特异性引物进行了验证。